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目的：建立茎环结构逆转录引物(简称茎环引物)的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR法,对CD4+T、HepG2、LO2及SP2／0四株细胞中miR-155进行检测,以验证方法可行性。收集宫颈刮取物标本(脱落细胞),分别检测HPV基因型,并应用建立的方法检测每份标本miR-155的表达水平,初步探讨宫颈癌及其HPV感染基因型别与miR-155表达水平的关系。方法：1、参照Caifu Chen等设计茎环逆转录引物,应用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR (real-time quantitative PCR)检测CD4+T细胞、HepG 2细胞、L02及SP2／0细胞的miR-155表达水平,同时分析熔解曲线,验证方法的可行性。2、选择临床诊断为宫颈无明显异常的对象15例、经病理学诊断为宫颈癌的患者25例及宫颈炎的患者20例的宫颈刮取物标本,用所建立的方法对此60份标本的miR-155表达水平进行检测,分析miR-155表达水平与宫颈癌及其感染的HPV基因型别的关系。其PCR反应产物通过电泳验证了产物的特异性。结果：1、所建方法能特异性检测到miR-155的扩增信号,最低检出限为10-7nmol／L,在10-1nmol／L～10-6nmol／L之间有良好的线性关系,相关系数为0.99,扩增后唯一的熔解曲线特异峰显示很好的特异性。CD4+T、HepG2细胞、LO2及SP2／0细胞株及60例临床宫颈刮取物标本miR-155均显示阳性,PCR反应产物电泳可获得单一条带。2、首先报道宫颈刮取物标本中miR-155与宫颈癌有关(P<0.05),但与本研究涉及的HPV基因型别无关(P>0.05)。结论：所建立的茎环引物的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR法能快速、敏感、特异地检测细胞株和临床宫颈刮取物miR-155的表达水平,为进一步研究miR-155在宫颈癌癌变的作用机理及其作为早期基因标志物奠定了基础。