深绿木霉H18-1-1和H18-1-1-t菌株生防效果评测

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木霉菌(Trichoderma spp.)是一种自然界中分布十分广泛的真菌,也是具有广阔应用前景的生防真菌。木霉菌可产生多种对植物病原真菌、细菌及昆虫具有拮抗作用的生物活性物质,并能提高农作物的抗逆性,促进植物生长和提高农产品产量。木霉作为重要的生防菌,被广泛用于农业有害生物的生物防治。Taugt17b1基因在深绿木霉中编码的是一种外泌的糖苷转移酶,也是深绿木霉中发现唯一的外泌糖苷转移酶,这种外泌糖苷转移酶具有增强深绿木霉菌株在寄主根部定殖能力的功能。本实验室前期筛选获得一株具有良好生防效果的深绿木霉菌株H18-1-1(专利号:ZL201710323760.X),并采用基因过表达技术将糖苷转移酶Taugt17b1基因在深绿木霉菌株H18-1-1中过表达,获得过表达菌株H18-1-1-t。本研究拟利用小白菜做为靶标作物,测定两株木霉菌株对小白菜生长发育及抗病性等方面的影响,进而确定H18-1-1和过表达菌株H18-1-1-t的生防效果。主要研究结果如下:1.对8种主要病原菌平板对峙试验结果表明:原始菌株H18-1-1和过表达菌株H18-1-1-t对病原菌均具有良好的抑制效果,过表达菌株H18-1-1-t对假禾谷镰孢菌(Fusarium pseudograminearum)、轮枝镰孢菌(F.verticillioide)、禾顶囊壳、(Gaeumanomyces graminis)、麦根腐平脐蠕孢(Bipolaris sorokiniana)、层出镰孢菌(F.proliferatum)的抑制效果更显著。2.过表达菌株的定殖能力在检测的5 d内始终高于原始菌株,在第3 d时的定殖能力最高,为原始菌株的1.55倍,过表达菌株在小白菜根部的定殖能力要高于原始菌株。3.原始菌株H18-1-1和过表达菌株H181-1-t对小白菜的促生效果测定结果表明:过表达菌株H18-1-1-t与原始菌株H18-1-1同对照组相比可以明显的提高小白菜的干重、根长、叶长、叶绿素含量生长指标,施用106个/m L孢子悬浮液促生效果更为显著。但在相同浓度下两木霉间差异不显著。温室盆栽试验和大田试验取得了相似的结果。4.盆栽试验测定结果表明,过表达菌H18-1-1-t与原始菌株H18-1-1对小白菜茎基腐病均具有较好的防治效果,过表达菌H18-1-1-t对小白菜茎基腐病的防治效果更为显著。5.盆栽试验和大田试验对小白菜防御酶系的测定结果表明,过表达菌株和原始菌株可以提高小白菜叶片的超氧化物歧化酶、过氧化物酶、以及过氧化氢酶的活性,且提高防御酶编码基因表达水平。在提高防御酶活性和防御酶编码基因表达水平方面,过表达菌株显著高于原始菌株。上述研究结果表明:深绿木霉H18-1-1和H18-1-1-t菌株都可以明显提高小白菜防病、促生效果、防御酶系活性和防御酶编码基因相对表达水平。与原始菌株相比,过表达菌株的生防效果更为显著。
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