论文部分内容阅读
近年来由于小尾寒羊养殖量增大,饲料资源季节性缺乏,在生产上常出现“一年养半年长”的现象。其主要原因是能量负平衡,直接影响了养羊业的经济效益。能量是人类赖以生存的基础,也是动植物生存的物质基础,保持能量平衡对于生存具有关键作用。而腺苷一磷酸激活的蛋白激酶(AMPK)是一种对能量平衡改变非常敏感的酶类,在应激动物的代谢中具有特殊的调节作用,一旦被激活,就会开启分解途径产生ATP,并且关闭ATP消耗过程,从而调节体内的能量平衡。本试验选择健康的3月龄体重相近的小尾寒羊18只,随机分为3组,每组6只。按国家肉羊饲养标准(NY/T816-2004)中的能量需要量配制日粮。A组采用正常营养水平日粮饲喂；B组饲喂A组采食量的60%,C组饲喂正常营养水平日粮直到屠宰前禁食72h。饲养期30d,每周空腹称重并采血,测定血清中血糖、胆固醇、甘油三酯及碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶等相关指标。试验结束后全部屠宰,宰后立即取下丘脑、心、肝、脾、肾、骨骼肌、脂肪、十二指肠等组织样品,通过免疫组织化学和荧光定量PCR对AMPKα亚基进行定位和定量。研究能量负平衡对小尾寒羊肠道组织学形态及营养物质的利用的影响。研究禁食条件下小尾寒羊AMPKα亚基核酸水平的变化以及其下游靶蛋白糖脂代谢关键酶的活性变化。试验结果表明：1.通过免疫组织化学检测发现,小尾寒羊AMPKα亚基分布广泛,在下丘脑、肝脏、心脏、骨骼肌、脾脏、肾脏和十二指肠中均有分布。P-AMPKα(Thr172)在下丘脑、十二指肠、心脏、肝脏、骨骼肌和肾脏中均有分布。2.通过荧光定量PCR发现AMPKα1mRNA表达量在下丘脑、肝脏、心脏、骨骼肌和脂肪组织中高于对照组,但均不显著(P>0.05),十二指肠、肾脏、脾脏低于对照组且与对照组差异不显著(P>0.05)。AMPKα2mRNA表达量在下丘脑、肝脏、心脏、脾、肾和十二指肠中与对照组相比差异不显著(P>0.05),骨骼肌、脂肪表达量与对照组差异显著(P<0.05)。能量负平衡时,小尾寒羊AMPK及其下游糖脂代谢关键酶的活性也发生了变化,肝脏、脂肪、十二指肠和骨骼肌AMPK酶活处理组均高于对照组但无显著性差异(P>0.05),处理组GPAT和ACC的酶活与对照组无显著差异(P>0.05),肝脏CPT活性与对照组差异极显著(P<0.01),脂肪的CPT活性与对照组差异显著(P<0.05),十二指肠和骨骼肌CPT活性与对照组无显著差异(P>0.05)。能量负平衡时,处理组血糖与对照组之间无显著差异(P>0.05),甘油三酯、胆固醇、碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶、谷草转氨酶、谷丙转氨酶处理组均极显著低于对照组(P<0.01)。3.能量负平衡时,小尾寒羊结肠长度显著低于对照组(P<0.05),其余肠道各段长度与对照组无显著差异(P>0.05)。结肠的鲜重显著低于对照组(P<0.05),其余各段鲜重与对照组无显著差异(P>0.05)。瘤胃的鲜重处理组极显著低于对照组(P<0.01),瓣胃、皱胃鲜重处理组显著低于对照组(P<0.05),网胃鲜重处理组与对照组之间无显著差异(P>0.05)。十二指肠、空肠、盲肠、结肠、直肠绒毛高度处理组略低于对照组(P>>0.05),回肠绒毛长度处理组略高于对照组(P>0.05)。处理组小尾寒羊瘤胃背囊上皮厚度和肌层厚度均高于对照组,但差异不显著(P>0.05),网胃、瓣胃上皮厚度和肌层厚度略低于对照组,差异不显著(P>0.05)。粗蛋白、粗脂肪、干物质、酸性洗涤纤维、中性洗涤纤维表观消化率随能量水平的下降而上升。粗蛋白质、粗脂肪的表观消化率处理组高于对照组,但无显著性差异(P>0.05),干物质和中性洗涤纤维表观消化率处理组极显著高于对照组(P<0.01),酸性洗涤纤维表观消化率处理组显著高于对照组(P<0.05)。4.禁食应激条件下,处理组AMPKα1mRNA表达量在下丘脑、肝脏、心脏、十二指肠、肾脏组织中均低于对照组,但差异不显著(P>0.05),而骨骼肌、脂肪、脾脏高于对照组(P>0.05)；处理组AMPKα2mRNA表达量在骨骼肌、脂肪组织中显著高于对照组(P>0.05)。禁食组肝脏AMPK的活性略高于对照组,但差异不显著(P>0.05)。禁食组GPAT和ACC的活性均低于对照组(P>0.05)。禁食组CPT活性显著高于对照组(P<0.05)。禁食组葡萄糖浓度低于对照组(P>0.05),甘油三酯、胆固醇的浓度显著低于对照组(P<0.05),碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶浓度高于对照组(P>0.05),谷草转氨酶略低于对照组(P>0.05)、谷丙转氨酶高于对照组(P>0.05)。