甾体激素ELISA检测方法研究

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环境激素又称内分泌干扰物,是指干扰维持动物机能平衡和调节发育过程的天然激素的产生、释放、运输、代谢、结合、作用或排出的外源因子。它包括具有雌激素活性的化学物质、合成雌激素、植物雌激素及真菌类的雌激素等。甾体激素是环境激素中主要的一类,由于甾体激素不易生物降解,在极低的浓度条件下就会显示出较强的干扰内分泌的作用。人体内甾醇类物质摄入过多,可造成代谢失调,引起高血脂、高胆固醇、高血压、冠心病、脑中风等.本文利用从睾丸酮丛毛单胞菌中分离出降解酶基因3α-HSD,通过工程菌BL-21(DE3)进行了高效表达,得到了3α-羟类固醇脱氢酶,通过免疫方法获得了该蛋白的多克隆抗体,建立了一个快速高效的ELISA检测方法。通过该ELISA方法来检测不同样品中的甾醇类化合物。对长春市自来水、长白山天池、新立城水库、石头口门水库、伊通河、松花江、松花湖、查干湖、长春南湖等不同水源的20个取样点的检测,吉林省内已调查的样品都有不同程度甾体类激素污染,有些样品含量很高,其中ELISA检测方法检测松花湖甾体类激素总含量达(μg/mL)34.4799,新立城水库甾体类激素总含量达(μg/mL)16.4800,并选部分样品HPLC检测,并对两种方法进行比较分析。结果表明,两种方法检测效果相附,并有雌激素的类似物存在。ELISA方法快速、灵敏、广普,为今后利用免疫学方法检测甾体激素提供了实验技术基础,对食品安全提供信息。
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