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目的通过研究补肾活血方对自身免疫性卵巢早衰小鼠脾脏T淋巴细胞亚群及卵巢细胞学的影响,明确补肾活血方防治自身免疫性卵巢早衰的机理。方法首先以小鼠透明带3多肽片段作为造模试剂,建立BALB/C雌性小鼠自身免疫性卵巢早衰的模型。以补佳乐为阳性对照,用补肾活血方高、低剂量干预,连续给药4周后处死小鼠。最后运用光学显微镜观察卵巢细胞学变化,利用微毛细管式细胞分析/计数仪检测脾脏CD4+、CD8+及CD4+/CD8+T淋巴细胞的比值的变化。结果1.小鼠脾脏指数:模型组、补肾活血方低、高剂量组与空白相比无差异(P>0.05),但空白组与补佳乐组有显著差异(P<0.01),四组小鼠脾脏指数均高于空白组,以补佳乐组最高;模型组与补佳乐组相比有显著差异(P<0.01),但模型组与补肾活血方低、高剂量组相比较,均无显著差异(P>0.05);补佳乐组与补肾活血方低剂量组相比有差异(P<0.05),但与补肾活血方高剂量组相比无差异(P>0.05);补肾活血方低、高剂量组两者之间比较无差异(P>0.05)。2.小鼠卵巢细胞学变化:空白组小鼠卵巢卵泡清晰可见,卵巢各处无明显的淋巴细胞和浆细胞浸润;模型组小鼠卵巢卵泡变小,甚至卵泡闭锁,卵泡和卵巢间质部位有明显的浆细胞和淋巴细胞浸润;观察补佳乐组和补肾活血方低剂量组的卵巢,卵泡数目与模型组相比略有增加,卵泡或卵巢间质中仍有明显的淋巴细胞及浆细胞侵袭。补肾活血方高剂量组的卵泡数目明显多于模型组,卵巢中淋巴细胞和浆细胞明显少于模型组。3.小鼠脾脏CD8+T淋巴细胞变化:补佳乐组、补肾活血方低和高剂量组与空白组相比均有差异(P<0.05),空白组与模型组之间无显著差异(P>0.05),但模型组明显高于空白组:补佳乐组、补肾活血方低和高剂量组与模型组相比有差异(P<0.05),均低于模型组;补肾活血方低剂量组与补佳乐组相比有差异(P<0.05),但与补肾活血方高剂量组相比无差异(P>0.05);补肾活血方组之间无显著差异(P>0.05)。4.小鼠脾脏CD4+T淋巴细胞的变化:补佳乐组、补肾活血方低、高剂量组与空白组相比均有显著差异(P<0.01),而模型组与空白组相比无差异(P>0.05);补佳乐组、补肾活血方低、高剂量组与模型组相比均有显著差异(P<0.01),前三组呈明显下降趋势;补佳乐组与补肾活血方低、高剂量组组相比均无显著差异(P>0.05),但后两组均呈下降趋势;补肾活血方两组之间比较无明显差异(P>0.05)。5.小鼠脾脏CD4+/CD8+T细胞的比值:模型组与空白组相比有差异(P<0.05),补佳乐组、补肾活血方低、高剂量组与空白组相比无差异(P>0.05);补肾活血方低、高剂量组与模型组比较均有差异(P<0.05),模型组与补佳乐组比较无差异(P>0.05);补佳乐组、补肾活血方高、低剂量组两两比较无明显差异(P>0.05)。结论1.补肾活血方能够改善自身免疫性卵巢早衰小鼠的卵巢功能;2.补肾活血方能够调整自身免疫性卵巢早衰小鼠脾脏的CD4+/CD8+T细胞的比值趋于正常状态,改善小鼠局部免疫功能。