论文部分内容阅读
胶质瘤是颅内肿瘤中发病率最高的，其发病机制尚未完全明确，主要的治疗方法是手术加放化疗，但并未明显提高患者的生存时间和生活质量。全反式维甲酸(Alltrans retinoic acid, ATRA)在急性早幼粒细胞白血病（acute promyelocytic leukemia，APL）的治疗中取得成功，其中ATRA是通过结合维甲酸受体（Retinoic acid receptor，RAR）发挥其作用，且ATRA对实体肿瘤的作用也逐渐被发现。但有关ATRA作用于胶质瘤的研究很少，因此有进一步研究的价值。目的：研究ATRA及维甲酸受体激动剂或拮抗剂对U251胶质瘤细胞增殖和迁移的影响，探讨维甲酸受体激动剂或拮抗剂对ATRA抑制U251细胞增殖的调节，为ATRA能作为胶质瘤治疗的有效药物提供研究依据。方法：(1)使用1、2.5、5、10、20μMATRA分别处理U251细胞48h，观察ATRA对U251细胞的形态学变化和细胞迁移作用的影响，MTT检测ATRA对细胞的增殖作用的影响；(2)10μM ATRA分别联合四种药物[维甲酸受体激动剂(RARα激动剂，BMS7531μM)；维甲酸受体拮抗剂(RARα拮抗剂， Ro41-52531μM)；维甲酸受体激动剂(RXRα激动剂，CD32541μM)：④维甲酸受体（RXRα拮抗剂，UVI30031μM）]处理U251细胞48h，观察对U251细胞增殖和迁移的影响，MTT检测各组对细胞的增殖作用的影响；(3) Western blot检测U251细胞RARa，RXRa的表达情况。结果：(1)细胞划痕和MTT显示，ATRA可以抑制U251细胞的增殖与迁移，并呈剂量依赖性，ATRA联合RARα激动剂BMS753与ATRA组相比，对U251细胞增殖迁移的抑制作用增强；ATRA联合RARα拮抗剂Ro41-5253与ATRA组相比，对U251细胞增殖迁移的抑制作用减弱。(2) Western blot检测结果显示ATRA可以提高RARα受体蛋白表达，而对RXRα受体蛋白的作用不明显，ATRA联合RARα激动剂BMS753与ATRA组相比， RARα受体蛋白表达上升；ATRA联合RARα拮抗剂Ro41-5253组与ATRA组相比，RARα受体蛋白表达下降；ATRA联合RXRα激动剂CD3254与ATRA组相比，RXRα受体蛋白表达上升；ATRA联合RXRα拮抗剂UVI3003与ATRA组相比，RXRα受体蛋白表达量下降。结论：上述结果表明，ATRA对U251细胞增殖及迁移有抑制作用，这种抑制作用与RARα受体密切相关；RARα激动剂BMS753可以增强ATRA对U251细胞的抑制作用，RARα拮抗剂Ro41-5253可以减弱ATRA对U251细胞的抑制作用，这种作用与RARα受体表达水平相关联。研究结果为ATRA用于胶质瘤治疗的可行性及临床应用中联合用药以减少ATRA的使用量、降低其副作用的发生提供了依据。