重症急性胰腺炎大鼠肾损伤的病理生理变化

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目的:重症急性胰腺炎(SAP)是临床上比较常见的急腹症之一,其发病急,病势迅猛,多系统器官功能不全综合症(MODS)发生率高,严重时可发生急性肾功能衰竭(ARF)。本文通过动物实验,人为诱导建立大鼠重症急性胰腺炎模型,在零干预的情况下,动态观察肾脏损伤的各项指标,探讨重症急性胰腺炎不同病程时肾损伤的程度,为临床急性胰腺炎患者的诊断及治疗提供参考。方法:取健康SD大鼠96只,雌雄不限,体重300~350克,随机分为对照(SO)组和重症急性胰腺炎(SAP)组,每组实验动物48只。实验前12h开始禁食不禁饮,10%水合氯醛(0.3mg/100g)腹腔注射麻醉,开腹,显露胰胆管,阻断近肝门处胆管后,4号头皮针逆行插入胰胆管并固定,将3.5%牛黄胆酸钠按0.1ml/100g以恒速注入胰胆管,常规关腹,皮下注射生理盐水1ml/100g/h,补充血容量。对照组自胰胆管注入等量生理盐水。每组大鼠于模型制备后3h、6h、9h、12h分为四批,每批12只,经尿集笼留取各时间段尿样,-20℃低温保存,以备测定尿中β2微球蛋白含量;动物心脏采血5ml,随即3000r/min离心分离血清,-80℃低温保存,以备测定血清淀粉酶、BUN浓度;手术切除大鼠胰腺,甲醛固定后沿主胰管方向取胰腺组织一块;取左肾,甲醛固定后经肾门取肾组织一块,常规将胰腺、肾脏标本固定、脱水、浸蜡、包埋、切片。HE染色后光镜观察下观察胰腺形态学变化;肾脏标本一组HE染色后光镜观察下对肾损伤进行组织学评分,一组应用免疫组化测定肾组织中Il-1β的表达率。应用统计学方法对所得结果进行数据分析。结果:光镜观察下:SO组胰腺及肾脏标本均未见明显病理改变;SAP组:胰腺标本可见不同程度腺泡细胞坏死,间质充血、水肿,炎细胞浸润,间质红细胞渗出;肾脏标本可见肾小球萎缩,肾小管扩张,管壁细胞变形,呈扁平状,刷状缘损伤、脱落,细胞浆空泡形成,肾小管腔内有脱落的坏死组织,有时可见管型或碎片形成,间质内可见出血和炎细胞浸润。且随时间延长,胰腺及肾脏的各种病理表现呈加重趋势。血淀粉酶浓度、BUN浓度、肾损伤组织学评分、肾组织中Il-1β的表达率、尿中β2微球蛋白含量的各组数据统计分析结果如下:血淀粉酶浓度:SO组:254.50±76.74;SAP组:4123.08±847.75。以T检验所有数据结果:P<0.05,两组总体均数间差别有显著意义。进一步应用方差分析作各组内比较得出:SO组各时间段间无显著性差异(P>0.05),SAP组内各时间段:3h、6h、9h间均有显著性差异(P<0.05),9h、12h间无显著性差异(P>0.05)。血BUN浓度:SO组:7.44±0.68;SAP组:137.98±89.15。以T检验所有数据结果:P<0.05,两组总体均数间差别有显著意义。进一步应用方差分析作各组内比较得出:SO组各时间段间无显性著差异(P>0.05),SAP组间各时间段间均有显著性差异(P<0.05)。肾损伤组织学评分:SO组:14.13±8.34;SAP组:121.71±43.01。以T检验所有数据结果:P<0.05,两组总体均数间差别有显著意义。进一步应用方差分析作各组内比较得出:SO组各时间段间均无显著性差异(P>0.05);SAP组各时间段间均有显著性差异(P<0.05)。肾组织中Il-1β的表达率:SO组:各时间段均无阳性表达; SAP组:3h组均无阳性表达,6h组有1例阳性表达, 9h组有7例阳性表达,12h组均呈阳性表达。以RXC表进行多个率的比较,SAP组内各时间段间有显著性差异(P<0.05),用确切概率法进一步比较得出:3h组与6h组间无显著性差异(P>0.05),6h、9h、12h间均有显著性差异(P<0.05)。尿中β2微球蛋白含量:SO组:0.101±0.030;SAP组:0.330±0.097。以T检验所有数据结果:P<0.05,两组总体均数间差别有显著意义。进一步应用方差分析作各组内比较得出:SO组各时间段间均无显著性差异(P>0.05),SAP组各时间段间均有显著性差异(P<0.05)。结论:1.重症急性胰腺炎时肾损伤程度随SAP病程延长呈递增趋势;2.血浆BUN浓度对判断SAP时肾损伤程度及预后有重要参考价值. 3. Il-1β在重症急性胰腺炎肾组织中表达显著增加,Il-1β表达增加与SAP肾损伤程度具有密切关系,对于判断SAP肾损伤预后有重要意义;4.尿中β2微球蛋白含量能够较早地反映SAP肾损伤发生和程度。
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