B族Ⅰ型清道夫受体( Scavenger receptor class B type Ⅰ，SR-BI)是胆固醇逆转运过程中关键蛋白之一，它通过选择性摄取血浆中的HDL胆固醇(HDL-C)至肝细胞中，调节体内HDL-C水平。因而SR-BI的表达调控对于调节血脂水平，降低心血管疾病的风险具有重要意义。
　　本研究在第一部分发现了高脂饮食的ApoE-/-小鼠肝组织中，以及低密度脂蛋白LDL处理的肝细胞HepG2中，SR-BI表达均明显增加。为了研究SR-BI表达调控的机制，我们首先采用SR-BI基因启动子荧光素酶报告基因和RNAi等方法，发现了转录因子Sp1在这一调控过程中起到关键作用，当用Sp1-siRNA抑制细胞Sp1表达后，LDL便不能激活SR-BI的表达。但在HepG2细胞中过表达Sp1对SR-BI基因并无明显激活作用，而抑制Sp1的活性后SR-BI的表达水平明显降低。一系列的免疫共沉淀实验表明，LDL激活SR-BI表达时，SR-BI启动子区域Sp1与组蛋白乙酰化酶p300和组蛋白去乙酰化酶HDAC1构成的蛋白质复合物发生了改变，Sp1募集了更多的p300且同时与HDAC1分离，导致组蛋白乙酰化水平增加，从而激活基因转录。之后进一步考察了Sp1蛋白质复合物发生改变的原因，发现在LDL的作用下，Sp1的蛋白质翻译后修饰发生了变化，其磷酸化水平明显增加。通过对HepG2细胞在LDL作用下的磷酸化通路分析，发现在此过程中，ERK1/2激酶的磷酸化水平明显增加，当用抑制剂U1026处理后，LDL不能促进Sp1的磷酸化，也不能提高SR-BI的表达水平，说明了LDL是通过ERK1/2磷酸化通路影响Sp1的磷酸化水平来激活SR-BI的。为了研究Sp1的磷酸化与Sp1蛋白质复合物改变的关系，我们构建了真核表达重组质粒pFlag-Sp1，并通过生物质谱的方法分析了Sp1的修饰位点，结果鉴定到了Sp1蛋白的多个磷酸化位点，包括一个新的Sp1磷酸化位点Ser702，位于文献报道的与Sp1和HDAC1结合相关的区域，并通过构建702位丝氨酸突变Flag-Sp1蛋白的方法，观察到了该位点突变后，Sp1与HDAC1的结合将不受LDL的影响，证明了Sp1蛋白702位丝氨酸磷酸化在SR-BI激活过程的关键作用。
　　第二部分利用ApoE-/-动脉粥样硬化模型小鼠，建立了一套应用gel-LC-MS/MS无标记定量方法研究小鼠肝组织的差异蛋白质组的方法。结果表明，高脂饮食促使ApoE-/-小鼠的总胆固醇( Total cholesterol，TC)和LDL-C等血脂水平明显提高，主动脉粥样硬化斑块面积显著增加，说明动脉粥样硬化动物模型造模成功。正常和高脂饮食小鼠肝组织两组质谱数据分析结果共鉴定到了6677个蛋白和571个差异蛋白质，GO分类的结果中，这些差异蛋白主要参与代谢、转运等生物学过程，其中合成代谢蛋白质表达增加而分解代谢蛋白质表达降低。KEGG分析的结果表明，高脂饮食条件下，小鼠肝组织中PI3K-Akt磷酸化通路相关蛋白表达增加。建立的这套无标记定量的方法能快速简便分析动脉粥样硬化模型小鼠的蛋白质组表达水平，可用于后期动脉粥样硬化病理分子机制和候选药物的作用靶点及机制等研究。