原发性肝细胞癌的发病率高、生存率低已经是各个国家共同关注的健康难题，早期标志物诊断和晚期预后都是破解难题的重要手段。肝癌前期时传统的肝细胞癌生物标志物特异性不强，且标志物诊断方法耗时、复杂；肝癌中后期时因为个体差异性，抗排异药物的过量使用会产生药物不良反应。开发简单快捷、准确可靠，适合于大批量肝细胞癌血液样品中小分子代谢物和肝移植药物浓度的快速检测方法十分重要。本研究根据临床检验要求，选择快速前处理方法，优化QuEChERS、固相萃取、固相支持液-液萃取等净化方法，再结合优化后的LC和LC-MS/MS三重四级杆质谱技术，建立血液中肝移植药物的检测及小分子代谢物的定性定量检测，实现多组分的同时快速检测。以下为本研究的主要内容和结果：
　　1、建立了一种结合QuEChERS前处理方法与液相色谱-三重四级杆质谱的联用方法，实现了肝细胞癌血液中3种小分子代谢物的同时检测。血清样品经乙腈提取、无水硫酸镁盐析、PSA吸附剂净化后上机检测。实验结果如下：三种小分子代谢物的基质效应在0.79~1.55之间；标准曲线在10~100ng·mL-1范围内呈线性，线性关系良好，且线性相关系数均大于0.9917；三个浓度水平的加标回收率在77.5%~105.1%之间，精密度(n=5)均小于15%；检测限和定量限分别为为0.3~0.6ng·mL-1和1~2ng·mL-1之间。该方法简便、高效、准确性可靠，适合于大批量肝细胞癌血液样品中小分子代谢物的快速检测。
　　2、建立了一种结合固相萃取与液相色谱-三重四级杆质谱法联用同时测定肝细胞癌血液中6种小分子代谢物的方法。血清样品用0.1mol·L-1的ZnSO4溶液沉淀蛋白，取上清液加入三倍体积的乙腈混匀后过固相萃取柱，取上清液上机待测。实验结果如下：6种小分子代谢物的基质效应在0.81~1.22之间；标准曲线线性关系良好，线性相关系数均大于0.99904；三个浓度水平的加标回收率(n=6)在76.7%~116.8%之间，精密度均小于15%；检测限和定量限分别在0.1~1.2ng·mL-1和0.3~4.0ng·mL-1之间。该方法快速简便、准确性可靠，适合于临床大批量检测生物样本。
　　3、建立了一种结合固相支持液-液萃取测定霉酚酸酯及其代谢物的高效液相色谱-二极管阵列检测器的分析方法。样品用0.1mol·L-1的ZnSO4溶液沉淀蛋白，上清液加入等比例的0.1%甲酸水溶液(V/V)稀释后，经固相支持液-液萃取柱后氮吹干，甲醇复溶，取上清液进行测定。实验结果如下：MPAG、MMF、MPA三种物质的基质效应在0.98~0.99之间；在1~40μg·mL-1范围内呈线性，线性关系良好，线性相关系数均大于0.9958；三个水平加标回收率(n=6)在87.0%~107.3%之间，精密度均小于10%；检测限和定量限分别在0.1~0.3μg·mL-1和0.3~1μg·mL-1之间。本方法灵敏度高、快速准确、方便，可用于大批量检测生物样本。
　　所建立的分析方法不仅提高了检测效率和准确度，而且扩大前处理技术的基质应用范围，为其它的生物内源性小分子代谢物的检测提供参考。