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蜕皮甾酮是中药怀牛膝中主要的活性成分,在医药、化妆品、农药等领域得到广泛应用。本文主要以不同的现代提取分离方法提取怀牛膝中的蜕皮甾酮和总甾酮,并通过不同的实验优化方法选取较为合适的提取工艺条件。在用超临界流体提取怀牛膝中蜕皮甾酮的实验过程中,固定超临界CO2流体的流速为2L/min,静态萃取时间10min。首先考察夹带剂种类、夹带剂流速、提取压力和提取温度四个因素对提取结果的影响,得到初步的优化条件为:甲醇作为夹带剂,流速0.5mL/min,提取压力250bar,提取温度70℃。然后设计四因素三水平正交试验进行进一步的优化分析,优化出的提取条件为:提取压力250bar,提取温度70℃,夹带剂(DMSO)流速0.5 mL/min,动态提取时间1h。并通过方差分析得出各因素的影响水平,未发现具有显著性影响的因素,说明各因素对提取结果都具有一定的影响,且影响程度相当。在超声波提取怀牛膝中蜕皮甾酮和总甾酮的实验中,固定条件为:牛膝粉碎后过4号筛,超声频率为40kHz。首先通过单因素优化法得到优化条件为:超声提取时间20min,乙醇浓度60%,液料比10∶1,然后通过响应面分析法对工艺条件进行进一步的优化,得到理论最佳提取工艺,为便于实际操作,将最优提取工艺条件设定为,蜕皮甾酮提取条件:提取时间26min,乙醇浓度65%,液料比12∶1,平均提取含量为0.7471mg/g;总甾酮提取条件为:提取时间26min,乙醇浓度55%,液料比8∶1,平均提取含量为135.43mg/g。大孔树脂分离提取蜕皮甾酮和总甾酮的过程中,也是通过单因素法优化,以分离含量为指标,优化上样和洗脱条件为:上样液中蜕皮甾酮含量约为94.976μg/mL,总甾酮含量约为2.6417mg/mL,上样液体积5BV,上样流速0.6BV/min;洗脱条件为70%的乙醇5BV以0.8BV/min的流速解吸。