土壤拮抗放线菌的分离、筛选及活性产物的研究

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本试验以高氏一号培养基为分离培养基,对从陕西杨凌地区不同类型土壤中分离出的400多株放线菌进行皿内对峙筛选和液体发酵平板筛选,获得1株对多种植物病原真菌拮抗性较好且遗传稳定的新菌株J-129-08,其发酵液及粗粉具有较好的抑菌活性。主要研究结果如下:(1)对J-129-08菌株的发酵液进行生物活性测定,发现无论是在离体还是在活体条件下,其对病原菌均具有较强的抑菌活性。孢子萌发试验结果表明J-129-08发酵液对玉米大斑和烟草赤星病原菌(Alternaria alternata)的孢子萌发有较强的抑制作用,在600μg/ml浓度下抑制率分别为92.8%和83.2%,300μg/ml浓度下抑制率分别为67.8%和64.8%。温室盆栽试验结果显示J-129-08发酵原液对小麦白粉病(Blumeria graminis)的保护和治疗效果可达78.6%和72.2%,在较高浓度下(10倍液)对小麦白粉病的保护和治疗效果可达76.4%和66.0%。(2)对J-129-08菌株及其发酵液进行了稳定性研究,结果表明J-129-08菌株具有很好的遗传稳定性,连续传代10代其发酵液活性没有明显变化。其发酵液除了在pH=11的碱性环境下活性有所下降外,在酸性、不同温度条件下活性都无明显变化。这些结果表明J-129-08菌株本身及其发酵液具有很好的稳定性。(3)通过对J-129-08菌株的形态特征、培养特征和生理生化特征的观察,参照相关文献,初步鉴定其为链霉菌属(Streptomyces)淡紫灰类群。(4)对J-129-08菌株发酵液进行粗提,得到了具有生物活性的粗提物质,对其进行生物活性测定,生长速率法测定结果表明,J-129-08活性产物粗提物对供试的六种病原菌均有较强的抑制作用,在800μg/ml浓度下对稻瘟菌、番茄早疫菌、小麦赤霉菌、小麦根腐菌的的抑制效果均达80%以上,尤以对稻瘟菌的抑制效果最佳,达到了90.8%。孢子萌发试验结果表明J-129-08粗粉除对玉米大斑菌孢子萌发的抑制效果较差外,对稻瘟菌、小麦根腐、及烟草赤星菌孢子抑制作用十分显著,在600μg/ml浓度下即可达62.4%以上。温室盆栽试验结果显示J-129-08粗粉对小麦白粉病(Blumeria graminis)的保护作用较好,治疗效果不是很理想。
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