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目的探讨氨基肽酶N抑制剂(CD13抑制剂)乌苯美司在体外对人骨髓瘤细胞XG-1生长抑制、线粒体膜电位以及诱导人骨髓瘤细胞凋亡的作用及其作用机制。方法常规细胞培养,取对数生长期人骨髓瘤XG-1细胞,制成细胞悬液,按1.5×10~3/孔的密度接种,培养24h细胞完全爬片后,乌本美司组加入500,1000μg/ml的乌本美司,空白对照组加入1640培养液。乌本美司作用24,48h后,用光学显微镜观察细胞形态结构的改变;用Rhodamine123分别标记活细胞及经药物作用24h,48h后的细胞,流式细胞仪检测线粒体膜电位的变化;通过DNA片段原位末端标记法(TUNEL)检测凋亡细胞;SABC细胞免疫法检测细胞凋亡相关蛋白,检测细胞凋亡相关蛋白半胱天冬酶3(caspase-3)及Bcl-2的表达,计算其分别的阳性表达并计算细胞凋亡率,统计学分析细胞阳性率与细胞凋亡率之间的相关性;对实验数据进行统计分析。结果细胞凋亡形态:经乌苯美司1000μg/ml作用48h后的人骨髓瘤XG-1细胞可见细胞体积缩小,核质固缩,核膜核仁碎裂、溶解,胞质浓缩,出现典型的凋亡小体。镜下空白对照组人骨髓瘤XG-1细胞呈圆或椭圆形,并呈聚集状态生长,分布均匀,细胞膜完整、胞质透明清亮、细胞核一个或多个,形状大而圆,细胞生长状态良好;细胞免疫组化显示人骨髓瘤XG-1细胞表面呈黄染,证实人骨髓瘤XG-1细胞表面有大量CD13存在;细胞凋亡及形态观察:500,1000μg/ml乌苯美司作用24h后细胞凋亡率分别为(23.57±5.41)%,(58.35±8.45)%;在24～48h过程中,凋亡的细胞逐渐坏死,空白对照组24,48h后细胞凋亡率均为1%。线粒体跨膜电位的变化:Rhodamine123染色结果显示,1000μg/ml乌苯美司作用24h时线粒体膜电位荧光强度的峰值在100～1000,平均荧光强度明显低于空白对照组(135.53±15.09,223.37±13.82,P＜0.01);作用48h时线粒体膜电位荧光强度的峰值位于10～100,平均荧光强度显著低于空白对照组(35.81±5.93,221.36±24.79,P＜0.01);凋亡相关蛋白的表达:500,1000μg/ml乌苯美司作用骨髓瘤细胞48h后,凋亡相关蛋白caspase-3表达明显增高、Bcl-2表达则降低,并分别与凋亡率呈正相关与负相关;细胞DNA损伤:1000μg/ml乌苯美司作用24h后,TUNEL法检测细胞凋亡可见细胞核中出现棕黄色颗粒,即为DNA受损标志。结论乌苯美司在体外条下能够诱导人骨髓瘤XG-1细胞的凋亡,其诱导凋亡的机制可能是通过诱导细胞发生DNA损伤,增加凋亡相关蛋白caspase-3的含量、降低细胞凋亡相关蛋白Bcl-2的含量,从而干预线粒体跨膜电位实现细胞凋亡。