新穿心莲内酯对T淋巴细胞的辐射防护作用

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目的:机体受到电离辐射损伤时,会出现一系列急性和慢性应激过程,机体的器官、组织和细胞将会产生不同程度的损伤,这种损伤严重时会对生命造成威胁。新穿心莲内酯是穿心莲的一种化合物,也是一种中药成分,有研究发现其具有抗氧化损伤的作用,对辐射引起的细胞损伤具有一定防护作用。T淋巴细胞是一种重要的免疫细胞,能够抵抗病原微生物入侵,在机体发挥免疫过程中起着重要作用,然而它却是极易受到辐射损伤的一类细胞,因此研究新穿心莲内酯对T淋巴细胞的辐射防护意义十分重大。我们的研究将从细胞水平对放射损伤过程中T淋巴细胞增殖、微核率、细胞周期、线粒体膜电位进行深入探究,探讨新穿心莲内酯对T淋巴细胞的辐射防护作用。方法:通过预实验的研究,获得本次研究最佳给药剂量和辐射剂量,随后将32只实验小鼠随机分为实验组、药物组、辐射组、空白对照组。实验组进行辐射+药物处理,药物组只进行药物处理,辐射组只进行辐射处理,空白对照组不做任何处理。实验组、药物组小鼠在辐射前给予新穿心莲内酯灌胃处理,然后和辐射组、空白对照组小鼠放在相同环境下饲养14天,随后在饲养的第12天对辐射组和实验组小鼠进行60Co-γ射线2 Gy一次性全身辐射。辐射源距离小鼠100 cm,辐射视野80 cm×80 cm,吸收剂量率2 Gy/min,辐射时间1 min,辐射剂量2 Gy。在60Co-γ射线照射后第3天,用颈椎脱臼法将小鼠处死,将获得的小鼠T淋巴细胞进行实验检测。通过显微镜下计数,调整细胞浓度,加入CCK8试剂,记录各组小鼠T淋巴细胞增值情况;通过Giemsa染液染色,进行胞浆分裂阻滞微核试验检测各组小鼠T淋巴细胞微核情况;通过PI单染实验,检测各组小鼠T淋巴细胞细胞凋亡情况;通过Rhodamine123染色,检测各组小鼠T淋巴细胞线粒体膜电位变化差异。结果:(1)小鼠T淋巴细胞增殖率实验:于辐射时、辐射后12、24、36、48小时分别检测,空白对照组相对于辐射组T淋巴细胞增殖率分别增加了11.2%、49.2%、59.6%、65.3%、82%(P<0.05),实验组相对于辐射组增殖率分别增加了2.8%、13.7%、20.3%、13.5%、31.8%(P<0.05),药物组相对于辐射组增殖率分布增加了5.6%、28.6%、41.7%、31.4%、45.5%(P<0.05)。(2)在小鼠T淋巴细胞微核率实验:辐射组相对于空白对照组微核率增加了25倍(P<0.05),实验组相对于药物组微核率增加了50%(P<0.05),实验组相对于辐射组微核率减少了65.4%(P<0.05)。(3)小鼠T淋巴细胞周期检测实验:各组相对于空白对照组,细胞周期分布比例均有显著变化。实验组相对于辐射组,G1期细胞比例降低,S和G2+M期比例升高(P<0.05)。实验组相对于药物组,G1期细胞比例升高,S和G2+M期比例降低(P<0.05)。(4)小鼠T淋巴细胞线粒体膜电位检测实验:与空白对照组相比较,其它各组变化显著(P均<0.05)。实验组相对于辐射组,T淋巴细胞线粒体膜电位有较大升高(P<0.05)。结论:小鼠接受一定剂量60Co-γ射线辐射后T淋巴细胞会受到一定程度的辐射损伤。新穿心莲内酯能明显降低辐射后T淋巴细胞微核率,减少T淋巴细胞周期阻滞,恢复T淋巴细胞线粒体膜电位水平,抑制小鼠T淋巴细胞凋亡。新穿心莲内酯对T淋巴细胞具备一定的辐射防护作用。
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