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柑橘是世界上种植面积最广的水果之一,风味独特,营养价值高。酚类物质是柑橘果实中次生代谢产物的一个大类,有着重要的生理活性功能,目前是国内外关注的热点之一。作为世界四大经济类柑橘(宽皮柑橘、甜橙、葡萄柚和柚、柠檬)之一,柚类(C.grandis(L.) Osbeck)果实以其果形硕大、果肉晶莹脆嫩、风味清香独特、营养丰富、耐贮运而深受众多消费者喜爱,仅我国就有200多个柚类品种,包括琯溪蜜柚、沙田柚、脆香甜柚、玉环柚等地方特色品种。柚广泛种植于东南各省,年产量90万 t以上,是柑橘总产量的12.9%。本试验首次以我国42种柚及葡萄柚种质为材料,建立了超高效液相色谱法分别快速测定柚及葡萄柚果实中主要酚类物质的方法,较系统地研究了我国特色柚及葡萄柚果实中主要酚酸、香豆素、类黄酮等酚类物质的组成与分布,分析比较柚及葡萄柚果实中各酚类物质的含量差异,发现高酚类物质的柚及葡萄柚种质,旨在充实中国柚及葡萄柚功能成分数据库,为柚及葡萄柚酚类物质的定量检测与柑橘资源综合利用提供参考,也为柚及葡萄柚品种的分类、产地溯源、质量控制等体系提供数据支撑。 主要研究结果如下: (1)优化并建立了超高效液相色谱法快速同时测定柚果中7种酚酸(原儿茶酸、对羟基苯甲酸、香草酸、咖啡酸、p-香豆酸、芥子酸和阿魏酸)含量的方法,9 min内目标物能够完全分离,并辅以高效液相色谱串联质谱(LC-MS/MS)验证。各酚酸线性范围为0.01~50 mg/L,线性相关系数均在0.9997以上,果肉平均回收率为90.37%~109.95%,相对标准偏差为0.48%~7.12%,果皮平均回收率为90.38%~109.21%,相对标准偏差为0.16%~4.98%,方法检出限(LOD)为0.001~0.006 mg/kg(S/N=3)。 (2)优化并建立了超高效液相色谱法快速同时测定柚果中11种香豆素(伞形花内酯、滨蒿内酯、补骨脂素、柠檬油素、异橙皮内酯、欧前胡素、异欧前胡素、8-牻牛儿氧基补骨脂素、橙皮油素、香柠檬亭、5-牻牛儿氧基-7-甲氧基香豆素)含量的方法,13 min目标物内能够完全分离,并辅以超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)验证。各香豆素线性范围为0.005~200 mg/L,线性相关系数均在0.9997以上,果肉平均回收率为91.25%~109.34%,相对标准偏差为0.78%~5.84%,果皮平均回收率为93.62%~107.51%,相对标准偏差为0.88%~5.59%,LOD为0.0003~0.02 mg/kg(S/N=3)。 (3)初步研究了42个中国特色柚类品种果肉、果皮中类黄酮、酚酸和香豆素的组成。类黄酮组分研究结果表明,柚皮苷是最主要的类黄酮,其次是芸香柚皮苷、野漆树苷和枸橘苷。红马叙果皮、果肉中总黄酮含量最高(果皮:91408.16 mg/kg DW,果肉:46037.21 mg/kg DW)。柚及葡萄柚中类黄酮组成与含量的变化在各品种间有类似的趋势,且果皮中含量明显高于果肉。对于来自不同产地的同一柚类品种,所含类黄酮种类基本一致,但含量有所差异。酚酸含量研究表明,对羟基苯甲酸、阿魏酸、芥子酸、香草酸和p-香豆酸是主要的酚酸,红马叙果肉、果皮中酚酸总量最高(果肉:889.38 mg/kg DW,果皮:2126.78 mg/kg DW),42个不同柚类种质呈现相似变异模式。香豆素含量研究表明,果肉以异欧前胡素、橙皮油素和香柠檬亭为主,呋喃香豆素含量高于简单香豆素,宜安倭柚果肉中香豆素总含量最高(1039.73 mg/kg DW)。果皮以异橙皮内酯、橙皮油素和香柠檬亭为主,简单香豆素含量明显高于呋喃香豆素,四季抛果皮中含量最高(5961.65 mg/kg DW)。不同品种香豆素含量和种类差异较大,绝大多数品种果肉中香豆素含量明显低于果皮。