目的:利用含有人c-met cDNA全长的pRS2质粒,构建c-met胞外区重组体,并用重组体转染真核细胞表达含c-met胞外区的融合蛋白,为将来筛选c-met特异性抑制分子,进行抗肿瘤侵袭和转移研究提供基础。方法:用PCR扩增c-met的胞外区片段,限制性内切酶酶切,构建到pSecTaq2/Hygro B中,酶切、测序等鉴定后,重组体(pSecTaq2/Hygro B—C—met~m)转染CHO细胞,用RT-PCR、Western Blot方法检测重组蛋白的表达。通过竞争性结合抑制实验观察重组蛋白的对HGF介导的细胞离散、内皮细胞增殖有无影响,判断表达蛋白的生物活性。结果:成功构建出pSecTaq2/Hygro-c-met~m重组质粒,Western Blot方法检测出融合蛋白的表达。离散实验发现重组蛋白能够明显抑制HGF对HepG2细胞离散及内皮细胞增殖作用。结论:成功构建肝细胞生长因子受体(c-met)胞外区蛋白真核表达载体,在CHO细胞中获得分泌性表达,这种分泌蛋白可以竞争结合HGF,应该有c-met胞外区活性。