磁感应热疗与放疗对小鼠4T1乳腺癌转移模型治疗疗效的实验研究

来源 :中南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shunniu
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第一章磁感应热疗与放疗对小鼠4TI乳腺癌皮下移植瘤的抑制作用  目的:探讨磁感应热疗联合放疗在小鼠4T1乳腺癌细胞株皮下移植瘤模型中的治疗作用。  方法:小鼠经皮下移植4T1乳腺癌细胞株,建立皮下移植瘤模型,待肿瘤直径达到10mm左右,然后将其分为以下4组进行处理:标准对照组(未做任何特殊处理,C组)、单纯热疗组(48±2℃10min,MIH组)、单纯放疗组(10Gyx2次,R组)、热放联合组(10Gyx1次+48±2℃10min,MIH+R组)。观察各治疗组和对照组的肿瘤体积的大小、肿瘤体积抑制率。每组分别在实验处理后24小时处死3只小鼠应用免疫组化和Western-blotting检测肿瘤组织中Bc1-2和Caspase-3的表达情况。  结果:热疗后的第1-4周MIH+R组的肿瘤体积抑制率分别为(64.38±17.97)%、(73.90±9.48)%、(77.43±10.71)%、(73.17±8.58)%:MIH组的分别为(40.66±21.46)%、(54.60±10.20)%、(51.22±5.05)%、(39.53+5.49)%;R组的肿瘤体积抑制率分别为(51.60+18.93)%、(57.53±9.76)%、(52.34±7.42)%、(35.42±4.14)%。与对照组相比,各治疗组均能抑制肿瘤的生长(P<0.05)。其中以MIH+R组抑瘤作用最显著。与其它组相比,Bc1-2在MIH+R组的表达显著下降,而Caspase-3的表达显著上升,差异具有显著性(P<0.05)。  结论:磁感应热疗与放疗均能诱导肿瘤细胞凋亡,有效地抑制小鼠4T1乳腺癌细胞株皮下移植瘤的生长,而磁感应热疗与放疗的联合治疗的抑瘤作用最显著,而且降低了放疗剂量。  第二章磁感应热疗与放疗对小鼠4TI乳腺癌肺转移灶和生存期的影响  目的:探讨磁感应热疗与放疗在小鼠4T1乳腺癌细胞株皮下移植瘤模型中对小鼠出现肺转移灶和生存期的影响。  方法:小鼠经皮下移植4T1乳腺癌细胞株,建立4T1乳腺癌肺转移模型,待肿瘤直径达到10mm左右,然后将其分为以下4组进行处理:标准对照组(未做任何特殊处理,C组)、单纯热疗组(48±2℃10min,MIH组)、单纯放疗组(10Gyx2次,R组)、热放联合组(10Gyx1次+48±2℃10min,MIH+R组)。距皮下接种28天后,每组处死6只小鼠,比较各组的肺转移灶和生存期情况。每组分别在实验处理后24小时处死3只小鼠应用免疫组化和Westem-blotting方法检测肿瘤组织中VEGF、MMP-9基因的表达情况。  结果:各治疗组的小鼠肺脏表面的转移性结节均少于对照组,正常对照组小鼠的肺湿重为0.18 g±0.01,热放联合组小鼠肺湿重为0.22 g±0.01,单纯热疗组小鼠肺湿重为0.20 g±0.01,单纯放疗组小鼠肺湿重为0.40 g±0.02,荷瘤对照组肺湿重为0.45 g±0.04。结果发现,热放联合组及单纯热疗组小鼠的肺湿重与正常对照组小鼠比较无显著差异(P>0.05),但与荷瘤对照组的相比较明显偏低,有统计学差异(P<0.05)。肺湿重以MIH组最轻,与其他组相比较差异具有显著性(P<0.05)。与对照组相比,联合组平均生存期40.70±3.06d,差异有统计学意义(P<0.05),单热组平均生存期51.30±3.77d,有显著性差异(P<0.01)。单热组的平均生存期与联合组比较明显延长,并有显著性差异(P<0.05)。VEGF、MMP-9在磁感应热疗组中的表达显著下降(P<0.05)。  结论:磁感应热疗能够抑制转移相关基因VEGF和MMP-9的表达,并抑制肿瘤的肺转移;放射治疗未能下调转移相关基因VEGF和MMP-9的表达;磁感应热疗可以有效延长荷瘤小鼠的生存期。  第三章磁感应热疗与放疗对小鼠4TI乳腺癌移植瘤抗肿瘤免疫功能的影响  目的:探讨磁感应热疗所致的4T1乳腺癌细胞株皮下移植瘤模型中的机体免疫的影响作用。  方法:小鼠经皮下移植4T1乳腺癌细胞株,建立4T1乳腺癌肺转移模型,待肿瘤直径达到10mm左右,然后将其分为以下4组进行处理:标准对照组(未做任何特殊处理,C组)、单纯热疗组(48±2℃10min,MIH组)、单纯放疗组(10Gyx2次,R组)、热放联合组(10Gyx1次+48±2℃10min,MIH+R组)。每组分别在实验处理后24小时处死3只小鼠应用免疫组化和Western-blotting方法检测肿瘤组织HSP70的表达情况。在实验处理后2周每组分别处死3只小鼠,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)技术检测各组小鼠血清中INF-γ、IL-2的含量,并运用流式细胞技术检测各组小鼠外周血中CD4+T细胞、CD8+T细胞值,计算CD4/CD8比值。  结果:MIH+R组与MIH组中HSP-70的阳性表达率比单纯放疗组、对照组高,有统计学差异(P<0.05);ELISA技术检测发现实验处理后2周时小鼠血清中的INF-γ、IL-2的含量均较对照组有所提高,其中以单纯热疗组最高,具有统计学差异(P<0.05),流式细胞仪检测发现单热组和联合组的CD4+/CD8+比值相对对照组有所上升,并具有统计学差异(P<0.05)。  结论:磁感应热疗有效地激发小鼠机体免疫系统。
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