目的:近期有研究发现维替泊芬(verteporfin,VP)具有潜在的抗肿瘤作用,为肿瘤辅助性药物治疗带来新希望。但VP是否具有抗宫颈癌作用及其作用机制,目前尚不清楚。本研究旨在检测VP对宫颈癌细胞株HeLa和SiHa增殖、侵袭及迁移能力的影响;并进一步研究其作用机制。方法1 使用 CCK-8 法检测 0,0.5,1.0,2.0,4.0μmol/L(μM)VP 分别作用 24、48、72小时后,对宫颈癌细胞株HeLa和SiHa的增殖抑制作用,筛选合适的作用时间及药物浓度;2 平板细胞克隆形成实验检测溶剂对照组(Control,Ctrl)、1.5μM、3.0μM VP组HeLa和SiHa细胞克隆形成能力;3 Transwell迁移及侵袭实验分别检测1.0μM、2.5μM VP作用后,宫颈癌细胞株HeLa和SiHa迁移及侵袭能力的变化;4 流式细胞技术检测1.0μM、2.5μM VP作用于宫颈癌细胞株HeLa和SiHa细胞后,细胞周期的变化;5 分别用RT-PCR和Western blot法检测2.5μM VP处理后,HeLa和SiHa细胞中Yes相关蛋白(YAP)及结缔组织生长因子(CTGF)mRNA和蛋白表达水平。结果1 VP对宫颈癌细胞株HeLa和SiHa的增殖抑制作用呈时间和剂量依赖性,VP作用48小时,对SiHa和HeLa细胞的IC50浓度分别约为2.0μM和2.5μM,VP对SiHa细胞的增殖抑制作用较HeLa细胞更为明显。2 细胞平板克隆实验结果显示,对照组(Ctr1)、1.5μM、3.0μMVP组平均细胞克隆形成率分别为:16.4175%、9.8325%、4.9175(HeLa)和 18.0000%、7.0825%、3.2500%(SiHa)。VP处理后的宫颈癌细胞株HeLa和SiHa细胞克隆形成率均明显降低(p<0.001),且HeLa细胞中,3.0μM组克隆形成率低于1.5μM 组(p<0.05)。3 Transwell迁移实验结果显示,2.5μM、1.0μMVP处理组与Ctrl相比,穿孔细胞明显减少(SiHa:44.33±3.786、64.33±5.859、169.67±11.676;HeLa:66.33±6.028、82.00±10.583、159.67±10.504)(VP 组与 Ctrl 间p<0.001,SiHa VP 组间 p=0.047,HeLa VP 组间p=0.177);Transwell 侵袭实验结果显示,2.5μM、1.0μM VP处理组与对照组相比,穿孔细胞明显减少(SiHa:25.33±6.429、58.00±2.000、103.33±7.638;HeLa:28.33±5.859、77.67±8.505、125.00±5.568)(VP 组与 Ctrl 间 p<0.001,SiHaVP 组间 p=0.001,HeLaVP组间p<0.001)。4 流式细胞周期示:Ctrl、1.0μM、2.5μMVP组G1期细胞比例分别为68.83%、75.76%、81.85%(HeLa)和 68.31%、76.09%、83.33%(SiHa),与 Ctrl 相比,VP处理组细胞出现G1期阻滞(p<0.05)。5 VP处理后,YAP和CTGF蛋白及mRNA表达水平均明显降低(Westernblot法测蛋白结果:HeLa p<0.001,SiHa p<0.05;RT-PCR 测 mRNA 结果:p<0.001)。结论:VP可有效抑制宫颈癌细胞HeLa和SiHa的增殖,降低细胞迁移及侵袭能力,具有潜在抗宫颈癌作用。VP抗宫颈癌细胞作用机制可能与下调Hippo信号通路核心蛋白YAP及其作用靶点CTGF相关。