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研究背景：Oddi括约肌（sphincter of Oddi，SO）包绕于胰胆管汇合进入十二指肠处，是独立于十二指肠壁平滑肌，具有精细分工的肌性结构，在神经与激素的共同作用下，产生协调的舒缩运动，对调节胆囊充盈、控制胆汁排出及维持胆道系统正常压力具有重要作用。其功能紊乱可诱发胆道疾病、胰腺疾病及胃肠道疾病的发生。魏经国等研究表明高胆固醇血症（hypercholesterolemia，HC）可引起兔Oddi括约肌功能紊乱（sphincter of Oddi dysfunction，SOD），导致兔SO舒缩功能异常，SO处于挛缩状态。进一步研究表明SOD的发生可能与HC兔SO细胞内钙离子浓度(intracellular Ca2+，[Ca2+]i)过载有关，但机制尚不明确。 研究目的：在离体条件下观察HC兔SO肌环张力及反应性的变化，分别应用钙、钾离子通道阻断剂观察HC兔SO细胞钙离子通道和钾离子通道的变化，初步探讨其作用机制。 材料与方法：新西兰雌兔24只随机分成两组：对照组（control，CON）和高胆固醇血症（hypercholesterolemia，HC）模型组，每组12只，CON组饲以标准饲料，HC组饲以标准饲料+胆固醇（cholesterol，Ch），共饲8 wk。模型制成后，分别取两组兔SO第四军医大学硕士学位论文近心段制备成肌环，应用离体组织灌流系统调节肌环最适静息张力，在此基础上进行下列实验:观察两组50肌环的自主收缩运动、张力情况以及对KCI的收缩反应性变化。观察两组50肌环对舒张剂硝普钠（sodium nitroprusside，s碑）的舒张反应。分别应用钾离子通道阻断剂盐酸四乙钱（t etraethyloninmehloride，TEA）和四氨基毗睫（4一aminopyridine，4一AP）观察两组50细胞大电导钙激活型钾离子通道（l arge conductanceeaZ+aetivatedK+。hannels，BKc。）及电压依赖型钾离子通道（voltage dependent K+ ehannels，Kv）活性的变化。应用钙离子通道阻断剂硝苯地平（正fedipine，Nif）观察两组50细胞L型电压依赖性钙通道（longlasting voltaged即endentcalciUm ehannels，L一VDCs）活胜的变化。观察复钙对两组50肌环收缩反应的影响。实验结果:HC组的自主收缩频率高于对照组（P<O.05，t=2.86），自主收缩波幅较对照组降低（P<0.05，t=2.48）o以10 rnrno比为浓度梯度累积加入KCI至901111110比，HC组对低浓度KCI（10一4onlnlo比）收缩反应高于对照组（P<0.ol，片4.01）;而两组最大收缩力无显著差异，且均可被3 p moUL Nif完全缓解。用601nrnoFL KCI预收缩50肌环后加入SNP（0.Inmo比-1。比），在各个浓度点HC组的舒张反应均明显低于对照组 （尸<0.01，t=5.12）。两组肌环对TEA的累计收缩反应无明显差异，但HC组对TEA的相对收缩反应在各个浓度点（0 .1一10。比）均较对照第四军医大学硕士学位论文 组显著增加（P<O.05，t=2.71）。.两组肌环对4AP的累计收缩反应无明显差异，但HC组对 4一AP的相对收缩反应在各个浓度点（0 .5一16ol几）均较对照 组显著降低（P<O.05，t=2.62）。.50肌环在无钙东士ebs液中温育smin后，复钙引起两组肌环 明显收缩反应所需的C扩+浓度分别为0.1和1 .0。FL，HC 组显著低于对照组（P<O.01，t=4.91）o.复钙2.5ol/L诱发两组肌环的收缩反应均可被3“mo比Nif 完全缓解。用60。比KCI预收缩50肌环后加入Nif，两组 肌环对Nif（0 .Inmof几一3 0 mo比）的舒张反应在各个浓度点均 无明显差别。在Krebs液中先加入3“mo比Nif，再加入KCI 或CaC12，两组肌环均未发生明显收缩反应。结论: 本实验首次在离体条件下观察了HC兔50肌张力和收缩反应性变化，以及HC兔50细胞钾离子通道及钙离子通道活性变化，结果发现:.在离体条件下，高胆固醇血症兔50细胞乳通道活性降低，使 细胞易去极化，其结果导致50张力异常增高，应激性增强， 处于易激惹状态;.高胆固醇血症兔50细胞[C乒+1i处于过载状态，而BKca通道 活性的异常增高仍不能使细胞膜转换为完全超极化状态;.高胆固醇血症兔50细胞L一VDCs活性无异常改变。