黄嘌呤氧化酶（XO）能催化次黄嘌呤,使其转化成黄嘌呤,催化黄嘌呤直接转化成尿酸。因此,黄嘌呤氧化酶即为人体中产生尿酸的关键酶。痛风、高尿酸血症等病症就是由于人体内代谢的终产物尿酸没有被分解,在体内累积所引起的,所以寻找黄嘌呤氧化酶抑制剂对此类疾病的临床治疗有重要的意义。近年来黄嘌呤氧化酶抑制剂的研究已有报道,但是对于抑制剂与酶之间相互作用的研究却很少,故本文分别选取人工合成的化合物和车前草中黄酮化合物为研究对象,运用多种现代分析技术如抑制动力学技术与荧光光谱技术并结合分子模拟技术研究了目标化合物对黄嘌呤氧化酶的抑制作用,探究化合物结构与抑制酶活性之间的关系,为寻找治疗痛风药物的化学先导物研究提供理论依据。本课题首先合成了一系列取代苯甲醛缩氨基硫脲化合物（1-7）作为黄嘌呤氧化酶（XO）目标筛选抑制剂。采用紫外光谱,荧光光谱,分子对接等方法研究了取代苯甲醛缩氨基硫脲化合物（1-7）与XO的相互作用。荧光结果表明,取代苯甲醛缩氨基硫脲化合物与XO之间的相互作用主要为氢键和疏水性作用,在苯环的对位引入-OH可以增强抑制剂的抑制活性(化合物4,IC₅₀=19.32μM)。而分子对接表明,氨基末端引入的苯环与芳香族氨基酸残基如苯丙氨酸残基之间通过π-π堆积作用力与XO的疏水空腔相互作用,这大大提高了修饰剂的抑制活性(化合物7,IC₅₀=0.04μM)。我们推断在化合物4的氨基末端引入Ph-基团,在苯环的对位引入-OH基团是获得新型XO抑制剂的良好途径,并且值的下一步研究。另外,车前草中黄酮类化合物与黄嘌呤氧化酶的相互作用以及结合方式同样被探讨。活性测试表明,5种黄酮类化合物均表现出较好的酶抑制效果。其中,异泽兰黄素的抑制效果最强(IC₅₀=0.72μM)。ANS探针实验表明,化合物与ANS探针存在竞争关系,同时荧光峰面积减小的程度与抑制效果强弱相对应,暗示化合物特定位点基团的疏水性是衡量和预测抑制效果的重要参考。而核磁滴定与分子模拟表明,异泽兰黄素对酶的强烈抑制效果,是由氢键、范德华力、π-σ键和疏水作用力共同显现的。因此,我们可以得知,细微差异的黄酮结构往往因疏水作用的强弱及其他的相互作用而具有不同的抑制效果。同时本文的研究也有利于开发出高效安全的黄嘌呤氧化酶抑制剂,缓解高尿酸血症以及痛风。