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软枣猕猴桃(Actinidia aruguta)是雌雄异株植物,幼苗期难以鉴别植株性别给软枣猕猴桃的人工驯化栽培和种质资源创新利用带来了很多不便。本研究为了探索鉴别软枣猕猴桃性别的有效方法,以软枣猕猴桃雌雄株根系和叶片作为试验材料,通过测定雌雄株间生理生化指标,光合特性,同工酶差异以及利用SRAP标记手段探究其DNA差异,建立鉴别软枣猕猴桃性别的有效方法。试验结果如下:(1)软枣猕猴桃雌雄株BTB染色法在染色反应4 h时雌株吸光值显著高于雄株,TTC染色法在波长为485 nm处雌株的吸光值显著高于雄株(P≤0.05)。软枣猕猴桃雌雄株间花青素含量出现极显著差异(P≤0.01),即雌株的花青素含量显著高于雄株,约为雄株的3倍,然而,雌雄株间总酚、叶绿素和维生素C含量均未出现显著差异。软枣猕猴桃雌雄株间叶片和根系SOD活性无显著差异,但POD活性出现差异显著,即雄株根系POD活性显著高于雌株,而雄株叶片的POD活性显著低于雌株(P≤0.05)。软枣猕猴桃雌株的净光合速率日变化曲线为双峰型,而雄株为三峰型,雌株的蒸腾速率日变化曲线是单峰型,而雄株为双峰型;雌株的气孔导度日变化曲线为双峰型,而雄株为三峰型;雌雄株细胞间隙CO2浓度日变化曲线趋势基本一致,均出现三次高峰,但出现的时间和峰值具有显著差异。(2)软枣猕猴桃雌雄株过氧化物酶同工酶在6月3日(开花初期)出现了差异,雄株呈现4条谱带,雌株3条谱带。其中,迁移率Rf为0.12、0.17和0.38三条谱带为软枣猕猴桃雌雄株所共有的谱带,迁移率Rf为0.49的谱带为开花初期雄株所特有谱带。(3)分子水平上,利用SRAP分子标记手段,从初筛的80对引物中筛选出了 15对可以稳定扩增出多态性条带的引物组合。其中,雌株多态性比率为68.80%,雄株多态性比率为87.00%。4对引物的扩增结果表现出雌雄株间的多态性比率具有显著差异(me2-em1、me6-em6、me7-em5、me7-em7),供试的19个植株基于SRAP数据聚类分析分成两组,两组中均有70%以上表现出相同的性别。综上所述,本研究表明,BTB染色法和TTC染色法是鉴定软枣猕猴桃雌雄株的有效方法;花青素含量可作为鉴别软枣猕猴桃雌雄株的简易方法;软枣猕猴桃雌雄株间根系、叶片POD活性差异和光和特性差异对于性别鉴定起到辅助作用;软枣猕猴桃雄株过氧化物酶同工酶在出现了与性别相关的特征酶带,作为两性花类型植株筛选重要依据;软枣猕猴桃雌雄株的基因组具有较明显的差异,同时,基于性别相关的SRAP可以有效的分辨出雌雄株。