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本文旨在研究不同抗冻剂(甘油和乙二醇)对绒山羊精子冷冻过程中HSP70和HSP90表达与分布的影响。采集6只年龄相同、体况良好绒山羊的精液,混合后加入到含不同抗冻剂的稀释液中进行冷冻,解冻后检测了不同冷冻保护剂对精子的冷冻保存效果、HSP70和HSP90表达与分布。主要结果如下所示:1.比较了不同浓度的甘油和乙二醇对内蒙古绒山羊精液冷冻的效果。在内蒙古绒山羊精液冷冻稀释液中添加5%甘油,冷冻-解冻后精子活力为61.72%,显著高于3%乙二醇组和5%乙二醇组(分别为49.71、42.6%,P<0.05);5%甘油组的精子顶体完整率、质膜完整率(分别为60.14%、63.09%)显著高于3%乙二醇组(分别为43.26%、41.84%,P<0.05)和 5%乙二醇组(分别为 36.7%、31.96%,P<0.05);5%甘油组的精子DNA完整率为95.7%,与3%乙二醇组(95.37%,P>0.05)和5%乙二醇组(93.08%,P>0.05)之间差异不显著。因此,在稀释液中添加乙二醇作为精子抗冻剂,其冷冻效果并不优于甘油。说明5%甘油作为精子抗冻剂有较好的保护效果。2.比较了甘油和乙二醇对内蒙古绒山羊精子冷冻过程中热休克蛋白70表达与分布的影响。在内蒙古绒山羊精液冷冻稀释液中分别添加5%甘油和3%乙二醇作为精子冷冻过程中的抗冻剂,精子冷冻-解冻后,5%甘油组的精子中HSP70表达量为73.98ng/ml,显著高于3%乙二醇组(72.59ng/ml,P<0.05);5%甘油组精子中的HSP70分布在头部与尾部中段,而3%乙二醇组精子中的HSP70只分布在头部,尾部没有阳性信号;5%甘油组的精子中ATP含量显著高于3%乙二醇组(分别为9.89nmol/ml和9.49nmol/ml,P<0.05);在冷冻过程中添加鱼藤酮抑制精子氧化磷酸化反应后,不论5%甘油组还是3%乙二醇组,其精子中HSP70表达量(分别为71.7ng/ml,70.82ng/ml)均显著低于未添加鱼藤酮的5%甘油组和3%乙二醇组(分别为73.98ng/ml,72.59ng/ml,P<0.05);添加鱼藤酮后5%甘油组的精子中HSP70只在精子头部表达,尾部不表达,而添加鱼藤酮后3%乙二醇组的精子中HSP70分布未发生变化;另外添加鱼藤酮后5%甘油组的精子ATP含量显著低于未添加鱼藤酮的5%甘油组(分别为9.36nmol/ml和9.89nmol/ml,P<0.05),而添加鱼藤酮后3%乙二醇组的精子中ATP含量没有显著变化(P>0.05)。以上结果表明在冷冻-解冻过程中,甘油与乙二醇可以影响精子代谢方式,进而影响了精子中HSP70的表达和分布。3.比较了甘油和乙二醇对内蒙古绒山羊精子冷冻过程中热休克蛋白90表达与分布的影响。在内蒙古绒山羊精液冷冻稀释液中分别添加5%甘油和3%乙二醇作为精子冷冻过程中的抗冻剂,精子冷冻-解冻后,5%甘油组的精子中HSP90表达量为61.28ng/ml,显著高于3%乙二醇组(39.25ng/ml,P<0.05);5%甘油组精子中的HSP90分布在头部与尾部,阳性信号较强,而3%乙二醇组精子中的HSP90分布在头部与尾部,阳性信号较弱;在冷冻过程中添加鱼藤酮抑制精子氧化磷酸化反应后,不论5%甘油组还是3%乙二醇组,其精子中HSP90表达量(分别为37.93ng/ml,36.92ng/ml)均显著低于未添加鱼藤酮5%甘油组和3%乙二醇组(分别为61.28ng/ml,39.25ng/ml,P<0.05);但是添加鱼藤酮后并没有影响两组中的HSP90分布。以上结果表明在冷冻-解冻过程中,虽然甘油和乙二醇可以影响精子代谢的方式,但是对于精子中HSP90分布没有影响。综上表明,甘油和乙二醇作为精液抗冻剂添加到精子稀释液中,在冷冻-解冻过程中可以影响精子的代谢方式,并影响精子中HSP70表达与分布,但对HSP90的分布没有影响,精子中HSP70和HSP90表达与分布可能受到不同机制的调节。