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赤潮已成为危害性较大的全球性海洋生态灾害。球形棕囊藻作为南海海域的优势赤潮藻种之一,由于爆发时产生的大量泡沫使水域缺氧及其分泌的溶血性毒素,导致水体中的鱼虾贝类死亡;释放的含硫有机物会对海洋环境造成不利影响,同时也能加速酸雨的形成。防治球形棕囊藻赤潮是目前亟待解决的重大课题。近年来,利用溶藻细菌治理赤潮藻已成为研究的热点,而筛选分离出具有显著溶藻活性的细菌是研究的基础,溶藻细菌及活性物质的溶藻机理则是进一步阐释微生物治理赤潮的关键议题。本论文以球形棕囊藻为目标赤潮藻,从赤潮频繁爆发的珠海海域分离筛选具有高效溶藻效果的细菌,对该细菌的生理生化特征及菌属进行鉴定,初步研究溶藻细菌胞外活性物的溶藻特性,对无菌滤液溶藻过程的藻细胞形态和生理生化指标变化进行观察检测,从藻细胞程序性死亡的角度探讨溶藻作用机制,为寻找全新的溶藻微生物并从新的角度进一步认识细菌间接溶藻机理提供依据。主要内容如下:通过平板划线法从海水样本分离得到23株海洋细菌,其中两菌株Ts-6和Ts-12对球形棕囊藻表现出显著溶藻活性,溶藻率分别为88.6%和91.3%;细菌Ts-6菌落呈橙黄色,直径3-5 mm,细菌呈杆状,革兰氏阴性(G-);Ts-12菌落呈灰白色,直径2-3 mm,细菌呈杆状,革兰氏阳性(G+);细菌Ts-6能分解利用葡萄糖,并能利用色氨酸产生吲哚,而细菌Ts-12能分解利用葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和淀粉,并能分解含硫氨基酸生成硫化氢;通过对两菌株进行16S rDNA基因序列分析,细菌系统发育进化树表明Ts-6属于希瓦氏菌,而Ts-12属于芽孢杆菌。两株溶藻细菌的溶藻活性均随着菌液投加量和处理时间的增加而增强;细菌Ts-6和Ts-12均通过分泌胞外活性物质而间接杀藻,当两株细菌的培养上清液按1:3混合后,溶藻活性显著增强;细菌Ts-6对东海原甲藻有较强溶藻活性,对赤潮异弯藻有中等溶藻活性,而对中肋骨条藻的溶藻效果较差;Ts-12对赤潮异弯藻和中肋骨条藻有中等溶藻活性,而对赤潮异弯藻的溶藻活性很弱。两株溶藻细菌的溶藻活性物质均表现出较好的热稳定性;细菌Ts-6的活性物质的酸碱稳定性较好,而Ts-12溶藻活性物质的酸碱稳定性较差,最适pH范围为5.0-10.0;两菌株的溶藻活性物质均不是蛋白质和核酸等生物大分子物质;而且两者的极性都较强,易被二氯甲烷和乙酸乙酯等极性有机溶剂提取。细菌Ts-6的溶藻活性物质能够对球形棕囊藻造成氧化胁迫,使细胞活性氧产量急剧上升,并且还能破坏光合色素,使得叶绿素和类胡萝卜素含量同步下降;溶藻活性物质使得部分藻细胞经历程序性死亡:磷脂酰丝氨酸残基翻转至细胞膜外,随着溶藻胁迫的持续刺激,大部分的细胞失去质膜完整性,经历坏死途径而死亡;溶藻过程中,程序性死亡执行的关键蛋白Capase 3-like活性明显增强,球形棕囊藻细胞程序性死亡很可能由该酶介导;藻细胞程序性死亡早期,细胞染色质固缩,在中后期,出现DNA片段化的典型特征,同时部分坏死细胞或凋亡末期细胞表现出核染色质消失的现象。