厚朴化学成分及其调节血糖活性初步研究

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厚朴为木兰科植物厚朴Magnolia officinalis Rehd.et Wils.或凹叶厚朴Magnolia offinalis Rehd.et Wils.var biloba Rehd.et Wils.的干燥干皮、根皮及枝皮。具有燥湿行气、降逆平喘的功效,为我国传统芳香化湿药。目前,关于厚朴化学成分研究主要集中在对脂溶性小极性成分的研究上,对大极性成分的研究较少。传统中医临床上厚朴药材多以水煎入药,故对水溶性成分的研究应该引起重视。厚朴是治疗代谢性疾病的重要药物,且本课题组前期研究证明厚朴总酚具有一定程度的降糖作用。本文通过对厚朴大极性部位的化学成分的研究,进一步阐明厚朴调节血糖的代谢机制。综合运用硅胶柱层析、ODS柱层析、凝胶柱层析Sephadex LH-20、溶剂萃取法、结晶、重结晶等技术分离纯化,从中分离得到了 24个化合物,并利用理化性质和ESI-MS,UV,NMR,2DNMR等现代波谱学方法鉴定了其中19个化合物的结构。其中苯丙素类13个:(7S,8R)-syringoylglycerol(1),3,4-二羟基-烯丙基苯-3-O-α-L-吡喃鼠李糖(1→2)β-D-吡喃葡萄糖苷(2),3,4-二羟基-烯丙基苯-3-O-α-L-吡喃鼠李糖(1→6)β-D-吡喃葡萄糖苷(3),synapicaldehyde-4-O-β-D-glucopyranoside(4),丁香脂素双葡萄糖苷(5),厚朴酚(7),和厚朴酚(8),4-O-methylhonokiol(9),紫丁香苷(10),阿克苷(11),厚朴木脂素C(13),丁香脂素4-O-β-D-葡萄糖苷(17),3,3’,9’-三甲基-4’,5,9-三羟基-5’8-比邻-7’-烯4’-O-β-D-葡萄糖苷(19):黄酮3个:木犀草素-7-O-β-D葡萄糖苷(12),甘草苷(14),甘草素-7-O-β-D葡萄糖苷(15);3,4,5-三甲氧基苯基-β-D-葡萄糖苷(6),2,4,6-三甲氧基苯-1-O-β-D葡萄糖苷(16),十八-6-烯酸2,5-二羟-4辛酰-苯酯(18),其中化合物6、化合物12、化合物14~16为首次从厚朴中分离得到,化合物19为新化合物。选取厚朴水溶性部位中四种具有酚羟基的苯丙素结构的化合物。高糖培养HepG2细胞,1、10、100、200μM处理细胞后,采用MTT法考察大极性成分3,4-二羟基-烯丙基苯-3-O-α-L-吡喃鼠李糖(1→2)β-D-吡喃葡萄糖苷、丁香脂素双葡萄糖苷、3,4,5-三甲氧基苯基-β-D-葡萄糖苷及紫丁香苷对高糖培养下人HepG2细胞活性的影响,然后利用硫酸蒽酮比色法检测胰岛素刺激细胞糖原合成量。结果表明四种药物均可显著提高该细胞的胰岛素敏感性,尤其以100μM紫丁香苷作用HepG2细胞效果尤其显著,达到阳性对照罗格列酮(Rosiglitazone Hydrochloride,ROS)组效应的89.37%。由于肝脏对于机体内糖的贮存、分解和血糖调节等方面均至关重要,且具有酚羟基基团的化合物具有减少体内自由基,使得肝细胞膜脂质及其蛋白免受来自自由基的氧化,保护肝细胞的结构与功能使其恢复正常的作用。故推测厚朴这一治疗代谢性疾病的重要药物可能通过改善肝功能达到治疗糖尿病的目的。
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