目的:制备以可溶微针贴片为释药载体的卵清蛋白经皮免疫制剂。通过体外各项表征技术证实其经皮给药的可行性;通过动物实验探究其经皮免疫效应;通过皮肤刺激性试验等考察其经皮给药的安全性。以期能为可溶微针贴片经皮免疫的研究和疫苗的开发提供科学指导和理论依据。方法:1.采用精密机械制造技术和计算机辅助设计技术,设计和制备微针模具。2.应用两步注模干燥法制备载卵清蛋白的可溶微针贴片,并利用光学显微镜、扫描电子显微镜、离体皮肤穿刺实验建立可溶微针贴片体外评价方法,用来证实其经皮释药的可行性。3.建立可溶微针贴片中卵清蛋白含量测定方法,且通过可溶微针贴片的机械性能和载药量确定适用于本实验的最优处方,接着对最优处方制得的可溶微针贴片进行表面规整度、载药量、机械性能等表征。4.通过SDS-PAGE凝胶电泳实验对载卵清蛋白可溶微针贴片的稳定性进行考察。5.以SPF级SD大鼠为实验对象,以卵清蛋白(OVA)为模型抗原,通过测定接种后血清中抗OVA免疫球蛋白G(IgG)含量,对可溶微针贴片的经皮免疫效果进行评价。6.通过皮肤刺激性试验,溶血性试验,材料细胞毒性试验等研究可溶微针贴片的安全性,初步建立可溶微针安全性评价方法。结果:1.采用计算机辅助技术,制得可溶微针贴片的金属主模,再通过聚二甲基硅氧烷(PDMS)制备出可溶微针贴片阴模。模具含100个圆锥形微针,外观排列为10×10的方形矩阵。2.采用两步注模干燥法制备卵清蛋白可溶微针贴片,通过显微镜得出其针形完整,排列规整,离体皮肤穿刺结果可见:离体皮肤表面形成排列整齐的微孔,表明制备的可溶微针贴片具有足够的机械性能,可以成功穿透皮肤释放药物。3.通过机械性能和载药量两方面最终确定适用于本实验的最佳处方为:针部材料选择浓度为300 mg/mL的右旋糖酐(Dex)水溶液,基层选择浓度为333 mg/mL的聚乙烯吡咯烷酮(PVP K90)水溶液,模型抗原选择卵清蛋白(OVA)。4.SDS-PAGE凝胶电泳结果可见:在卵清蛋白水溶液特征条带出现的相应位置,可溶微针贴片水溶液出现相似的蛋白条带,且没有其他条带出现,空白可溶微针贴片水溶液无任何条带出现。5.可溶微针大鼠体内药效学实验结果表明,载OVA可溶微针贴片经皮免疫能成功引发大鼠体内免疫应答;与皮下注射免疫相比,减半剂量的可溶微针贴片可引发相当的抗体水平,而相同剂量的可溶微针贴片可以引发更高的抗体水平。6.经过皮肤刺激性试验,溶血性试验,材料毒性试验得出可溶微针贴片使用安全,对皮肤无刺激性。结论:本课题制备的可溶微针贴片具有良好的机械性能及经皮免疫优势,并且使用安全,无皮肤刺激性,能为可溶微针贴片经皮免疫的研究和疫苗的开发提供科学指导和理论依据。