【摘 要】
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[目的]探讨阻塞性睡眠呼吸暂停综合征（obstructive sleep apnea syndrome,OSAS）大鼠额叶损伤致认知障碍的相关机制。[方法]将60只健康成年的雄性SD大鼠随机分为对照组和实验组,每组30只。实验组进行OSAS大鼠模型复制（运用咽腔注射透明质酸钠凝胶法）,造模成功后分为实验2周组、实验4周组和实验6周组,每组10只;对照组不进行OSAS模型制造,分为对照2周组、对照4
【基金项目】
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OSAS致大鼠认知障碍与Nogo-A通路介导的额叶损伤相关机制研究,昆明医科大学研究生创新基金（2020S043）；
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[目的]探讨阻塞性睡眠呼吸暂停综合征（obstructive sleep apnea syndrome,OSAS）大鼠额叶损伤致认知障碍的相关机制。[方法]将60只健康成年的雄性SD大鼠随机分为对照组和实验组,每组30只。实验组进行OSAS大鼠模型复制（运用咽腔注射透明质酸钠凝胶法）,造模成功后分为实验2周组、实验4周组和实验6周组,每组10只;对照组不进行OSAS模型制造,分为对照2周组、对照4周组和对照6周组,每组10只;通过Morris水迷宫（morris water maze,MWM）实验检测OSAS大鼠的认知功能;蛋白质印迹法（western blot,WB）检测大鼠额叶皮质认知障碍相关蛋白NogoA、ERK1/2 及 BCL2 的表达;苏木精-伊红染色（hematoxylin-eosin staining,HE）及免疫组织化学染色（immunohistochemistry;IHC）观察大鼠额叶皮质适应性改变和小胶质细胞的变化。[结果]1.Morris水迷宫实验结果（1）定位航行训练实验结果:AFT（accelerated Failure Time）生存模型分析2、4、6周结果示对照组和OSAS组之间存在显着差异,p<0.0001,且OSAS组与对照组相比,随着时间的推移,OSAS组到达平台的概率是降低的。它还显示了每天多次游泳之间以及几天之间在一段时间内对照组和实验组找到隐蔽平台的趋势。在同一天时间的训练中,实验组大鼠平均逃避潜伏时间均长于同时间点的对照组,差异均有统计学意义（p<0.001）;并且,实验6周组大鼠平均逃避潜伏时间与对照6周组大鼠,差异更加显著,说明造模后继续饲养时间越长的OSAS大鼠,平均逃避潜伏时间越长。（2）空间探索实验结果:对于2、4、6周OSAS大鼠,在每个象限中停留的时间比例相似,差异没有统计学意义（P>0.05）。而对于对照组大鼠,在目标象限中停留的时间明显更长,从而导致分布不均匀,差异有统计学意义（p<0.05）。对照组大鼠偏爱目标象限TQ。2.WB检测结果OSAS组额叶皮质相关蛋白2W、4W的NogoA及ERK1/2的蛋白表达均低于同时间点的对照组,BCL-2蛋白表达均低于同时间点的对照组,差异均有统计学意义（p<0.05）3.HE染色结果大鼠额叶HE染色结果示:与OSAS组相比,对照组大脑额叶神经细胞排列有序,层次清晰,染色均匀,细胞形状规则。星形胶质细胞被认为是染色浅的胶质细胞,核仁明显。右侧大脑额叶OSAS2W组锥体细胞层可见星形胶质细胞轻度空泡化可能,组织轻度水肿;左侧大脑额叶胶质细胞呈不规则排列,瓦解,神经细胞核固缩,星形胶质细胞活化和反应性胶质增生,聚集可能。4.IHC检测结果与各时间点的对照组相比,除6周OSAS右侧组其他OSAS组小胶质细胞增多,部分细胞胞质深染。2、4周OSAS右侧额叶阳性细胞增多,与同时间点大鼠额叶比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。2、4、6周OSAS左侧额叶阳性细胞增多,与同时间点大鼠额叶比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。[结 论]1.OSAS大鼠并发了认知功能障碍;2.OSAS大鼠认知功能障碍与额叶皮质损伤有关;3.OSAS大鼠额叶皮质小胶质细胞和星形胶质细胞激活可能介导皮质损伤从而导致认知功能障碍。4.OSAS大鼠额叶皮质认知障碍可能与NogoA,ERK1/2-Bc12途径有关;5.R语言编程代码分析Morris水迷宫定位航行数据。
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