凡纳滨对虾特定腐败菌中AHLs介导的群体感应与调控的初步研究

来源 :中国海洋大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liang672369282
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本论文研究了凡纳滨对虾冰温贮藏条件下菌相组成变化与优势腐败菌的群体感应现象,通过群体感应抑制剂处理,研究了群体感应抑制剂对凡纳滨对虾特定腐败菌的群体感应的调控及对凡纳滨对虾腐败变质的抑制作用。此研究丰富了以群体感应为靶点的水产品贮藏保鲜理论,也为水产品的保鲜提供了新的思路与途径。本论文的研究内容包括以下4个部分:1.研究了冰温贮藏条件下凡纳滨对虾的菌相组成。在冰温贮藏条件下,从凡纳滨对虾虾肉中分离纯化得到463株细菌,通过形态、运动性、理化实验、16SrDNA对其进行了鉴定。结果表明,在冰温贮藏过程中,凡纳滨对虾的初始菌相和腐败菌相中革兰氏阴性菌均占90%以上。腐败菌相中,不动杆菌(50.6%)和黄杆菌—噬纤维菌群(36.14%)为优势腐败菌。2.研究了凡纳滨对虾特定腐败菌Aci-1、Aci-2 N-酰基高丝氨酸内酯(AHLs)的产生及活性变化。利用紫色杆菌Chromobacterium violaceum CV026和根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens A136(pCF218/pCF372)生物感应器双检测系统检测了两株优势腐败菌不动杆菌1(Aci-1)和不动杆菌2(Aci-2)的AHLs的产生情况。结果表明,Aci-1和Aci-2两株菌均能产生AHLs信号分子,且随着菌株浓度的增加,两株菌的AHls含量也增加。Aci-1和Aci-2中AHLs的产生受环境pH的影响,pH值过高将对信号分子的产生起到破坏作用。对Aci-1生物膜的研究发现,信号分子的添加量与其生物膜的生长量呈正相关,说明在不动杆菌中,其生物膜的形成受信号分子AHLs的调控。3.研究了群体感应抑制剂对Aci-1、Aci-2群体感应的调控。以裙带菜为原料提取群体感应抑制剂,通过单因素实验和正交实验确定了最佳提取工艺条件,即乙醇浓度75%,浸提时间3h,料液比1:6(g/mL),浸提温度65℃。群体感应抑制剂对Aci-1、Aci-2的信号分子AHLs的产生及生物膜的形成均具有一定的抑制作用,且抑制作用与群体感应抑制剂浓度呈正相关性。4.研究了凡纳滨对虾冰温贮藏过程中AHLs的产生规律与其腐败指标之间的关系以及群体感应抑制剂对其腐败过程的调控。凡纳滨对虾冰温贮藏过程中,AHLs的含量在贮藏4d时达最大,尔后随着贮藏时间的延长AHLs的浓度呈现下降趋势。群体感应抑制剂可降低对虾中AHLs的含量。同时,群体感应抑制剂可抑制凡纳滨对虾的腐败变质,保持凡纳滨对虾的新鲜品质,延长贮藏期。通过分析凡纳滨对虾贮藏过程中信号分子的产生与腐败指标之间的关系,推测群体感应抑制剂延缓凡纳滨对虾腐败的机理与其抑制AHLs信号分子的产生有关。
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