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目的:通过研究山茱萸果核对急性药物性肝损伤的保护作用,并对果核进行质量评价研究,为山茱萸果核防治药物性肝损伤的作用提供依据,为其作为保肝药物的开发提供理论参考。
方法:
1.利用醋氨酚致小鼠急性肝损伤模型,通过测定小鼠体内生化指标(AST、ALT、MDA、GSH-Px、SOD)及病理切片观察,考察山茱萸果核、果肉、全果防治急性药物性肝损伤的作用差异。通过急性毒性实验,对山茱萸果核的安全性进行评价。通过比较山茱萸果核大孔树脂不同洗脱部位对急性药物性肝损伤的保护作用差异,筛选山茱萸果核防治急性药物性肝损伤的有效部位。
2.利用高效液相色谱法(色谱条件:流动相是乙腈(A)-0.2%甲酸水溶液(B);梯度洗脱;流速为0.5mL·min-1和1.0mL·min-1;柱温为30℃;检测波长为270nm),建立14批山茱萸果核样品化学成分指纹图谱,并对其中4个化学成分进行含量测定。
结果:
1.与模型组比较,山茱萸果核、果肉、全果各剂量组能不同程度的降低小鼠血清中ALT、AST、MDA及升高肝组织中SOD、GSH-Px的水平,改善小鼠的肝组织病变程度,其中山茱萸果核防治药物性肝损伤的作用优于果肉和全果。小鼠急性毒性实验结果显示山茱萸果核未见急性毒性反应,小鼠生理状况良好,肝脏指数、肾脏指数正常,ALT、AST指标正常,各脏器病理切片与对照组比较均未见明显异常现象。通过比较山茱萸果核大孔树脂不同洗脱部位对急性药物性肝损伤的保护作用差异,结果表明果核60%乙醇洗脱部位效果显著。
2.建立了14批山茱萸果核样品的HPLC化学指纹特征图谱,标定了17个共有峰,指认了其中的6个共有峰,分别为没食子酸、5-HMF、原儿茶酸、莫诺苷、獐芽菜苷、马钱苷。根据相似度评价结果得不同产地的山茱萸果核在化学组成方面具有很好的相似性;根据聚类分析得山西阳城和河北望都产地的山茱萸果核与陕西大多数产地的差异较大,说明不同省份之间山茱萸果核的质量存在明显差异,宝鸡凤县和汉中镇巴的果核各聚为一类,说明不同市级之间山茱萸果核的质量存在较大差异。根据主成分分析得S1和S4聚为一类,S3、S5和S7聚为一类,S2、S6、S9、S10、S11、S12、S13、S14聚为一类,S8聚为一类,这与相似度分析及聚类分析结果基本一致。通过测定14批山茱萸果核样品中没食子酸、5-HMF、原儿茶酸和莫诺苷4个成分的含量,结果含量规律如下:没食子酸>莫诺苷>5-HMF≈原儿茶酸,其中山西阳城和河北望都两个产地的4个成分含量与陕西地区相比较均较低。
结论:山茱萸果核具有防治急性药物性肝损伤的作用,其有效部位为60%乙醇洗脱部位,可考虑将山茱萸果核作为保肝药物进行开发利用;初步建立了不同产地山茱萸果核化学成分指纹图谱及含量测定方法,为山茱萸果核的质量控制提供参考和依据。
方法:
1.利用醋氨酚致小鼠急性肝损伤模型,通过测定小鼠体内生化指标(AST、ALT、MDA、GSH-Px、SOD)及病理切片观察,考察山茱萸果核、果肉、全果防治急性药物性肝损伤的作用差异。通过急性毒性实验,对山茱萸果核的安全性进行评价。通过比较山茱萸果核大孔树脂不同洗脱部位对急性药物性肝损伤的保护作用差异,筛选山茱萸果核防治急性药物性肝损伤的有效部位。
2.利用高效液相色谱法(色谱条件:流动相是乙腈(A)-0.2%甲酸水溶液(B);梯度洗脱;流速为0.5mL·min-1和1.0mL·min-1;柱温为30℃;检测波长为270nm),建立14批山茱萸果核样品化学成分指纹图谱,并对其中4个化学成分进行含量测定。
结果:
1.与模型组比较,山茱萸果核、果肉、全果各剂量组能不同程度的降低小鼠血清中ALT、AST、MDA及升高肝组织中SOD、GSH-Px的水平,改善小鼠的肝组织病变程度,其中山茱萸果核防治药物性肝损伤的作用优于果肉和全果。小鼠急性毒性实验结果显示山茱萸果核未见急性毒性反应,小鼠生理状况良好,肝脏指数、肾脏指数正常,ALT、AST指标正常,各脏器病理切片与对照组比较均未见明显异常现象。通过比较山茱萸果核大孔树脂不同洗脱部位对急性药物性肝损伤的保护作用差异,结果表明果核60%乙醇洗脱部位效果显著。
2.建立了14批山茱萸果核样品的HPLC化学指纹特征图谱,标定了17个共有峰,指认了其中的6个共有峰,分别为没食子酸、5-HMF、原儿茶酸、莫诺苷、獐芽菜苷、马钱苷。根据相似度评价结果得不同产地的山茱萸果核在化学组成方面具有很好的相似性;根据聚类分析得山西阳城和河北望都产地的山茱萸果核与陕西大多数产地的差异较大,说明不同省份之间山茱萸果核的质量存在明显差异,宝鸡凤县和汉中镇巴的果核各聚为一类,说明不同市级之间山茱萸果核的质量存在较大差异。根据主成分分析得S1和S4聚为一类,S3、S5和S7聚为一类,S2、S6、S9、S10、S11、S12、S13、S14聚为一类,S8聚为一类,这与相似度分析及聚类分析结果基本一致。通过测定14批山茱萸果核样品中没食子酸、5-HMF、原儿茶酸和莫诺苷4个成分的含量,结果含量规律如下:没食子酸>莫诺苷>5-HMF≈原儿茶酸,其中山西阳城和河北望都两个产地的4个成分含量与陕西地区相比较均较低。
结论:山茱萸果核具有防治急性药物性肝损伤的作用,其有效部位为60%乙醇洗脱部位,可考虑将山茱萸果核作为保肝药物进行开发利用;初步建立了不同产地山茱萸果核化学成分指纹图谱及含量测定方法,为山茱萸果核的质量控制提供参考和依据。