精子获能是哺乳动物精子体内外受精的关键环节,它在1951年首次被描述,但其调控机制仍不清楚。获能过程包括碳酸氢盐和钙离子的流入,去核因子的去除,pH值和精子蛋白酶体活性的变化,以及蛋白质酪氨酸磷酸化的增加。学者对精子获能做了不少研究,例如精子获能培养液的组成成分,不同种属动物精子体外获能培养的最适成分以及获能诱导因子的研究。通过TMT技术结合LC-MS/MS手段对获能前后精子的差异蛋白进行分析研究,以期发现影响精子获能的关键蛋白,为进一步研究杜泊羊体外受精技术奠定基础。具体实验结果如下:1)本试验采用上游法（swim-up）获得获能精子后。通过获能前后精子活力检测发现,与获能前相比,获能后精子活力（MOT）和直线运动（VCL）明显增加。直线速度和平均速度在获能后显著增加（P<0.05）,这可能和精子获能时的超激活运动有关。但是精子的头部平均摆动幅度在获能后明显降低（P<0.05）。2)本试验通过质谱分析,一共鉴定到2378个蛋白,其中2050个可定量。定量的蛋白质中280种获能前精子中高丰度表达,68种在获能后精子中高丰度表达。其中有109种蛋白表现出显著差异。3)通过对杜泊羊获能前后差异蛋白组的GO分析发现,在生物学过程上,差异蛋白质主要参与细胞过程、生物信号过程、代谢过程、定位、细胞组成组织、生物调节、多细胞生物过程、发展过程、刺激反应等。在细胞定位上,差异蛋白质主要位于细胞、细胞器、细胞膜、高分子配合物、细胞外区域和膜封闭的管腔等。在分子功能上,差异蛋白质参与结合、催化活性、转运等。4)获能前后,PSM（蛋白酶体亚基）家族蛋白差异表达显著,其它差异表达蛋白互作紧密。PSM家族蛋白在精子获能和顶体胞吐中发挥重要作用,说明PSM家族蛋白是杜泊羊精子获能的直接关系蛋白,可以作为获能的标记物。