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目的:本研究采用大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,观察米诺环素对神经元凋亡、Caspase-12表达的影响。方法:采用大脑中动脉线栓闭塞法(线栓法)制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,缺血60min后恢复再灌注24h。45只健康成年雄性Wistar大鼠(230±10)g,随机分为假手术组(n=15)、缺血再灌注组(n=18)、米诺环素干预组(n=12)。取假手术组3只,缺血再灌注组6只,依据Zealonga神经功能评分及TTC染色结果判断造模是否成功;其余采用HE染色观察脑组织病理学改变,DNA原位末端缺口标记法(TUNEL)检测神经元凋亡,免疫组化法检测Caspase-12蛋白表达,反转录聚合酶链反应法(RT-PCR)半定量检测Caspase-12mRNA表达水平。结果:1.假手术组大鼠未出现任何神经缺失症状;缺血再灌注组大鼠出现不同程度的神经功能缺损。TTC染色示假手术组脑组织呈红色;缺血再灌注组梗塞苍白区域位于额顶颞叶皮质及纹状体外侧部。造模成功。2.HE染色:假手术组神经元形态结构正常;缺血再灌注组缺血半暗带(部分额叶皮层及纹状体内侧区)及海马CA1区脑组织结构变疏松,间质水肿有空腔形成,神经元数量减少,体积缩小,排列紊乱疏松,神经元核固缩,染色质边集;米诺环素干预组缺血半暗带区、CA1区结构完整的神经元明显增多,和凋亡细胞交错存在。3.TUNEL检测结果:假手术组仅有零星凋亡细胞分布;缺血再灌注组凋亡细胞显著增多(P<0.05);与缺血再灌注组组比较,米诺环素干预组凋亡细胞明显减少,但高于假手术组(P<0.05)。4.免疫组化:假手术组Caspase-12蛋白微量表达;缺血再灌注组表达明显增强(P<0.05),其表达的空间分布与TUNEL结果一致;与假手术组比较,米诺环素干预组Caspase-12表达亦有增强,但比缺血再灌注组表达减弱(P<0.05)。5.RT-PCR:假手术组Caspase-12mRNA呈低水平表达;缺血再灌注组表达增加(P<0.05);与缺血再灌注组比较,米诺环素干预组Caspase-12mRNA的表达降低,但高于假手术组(P<0.05)。结论:1.米诺环素可减轻缺血再灌注后脑组织病理改变,具有神经保护作用。2.米诺环素对脑缺血再灌注引起的缺血半暗带、海马CA1区的神经元凋亡有明显抑制作用,保护幸存神经元。3.米诺环素可有效抑制脑组织Caspase-12mRNA转录水平及其蛋白表达,从而减少神经元的损伤和凋亡。