以50个基因型大白菜（Brassica campestris ssp.pekinensis Lour.）品种为试材,采用游离小孢子培养方法,对影响小孢子胚诱导的因素,促进小孢子植株再生的方法,小孢子再生植株的培养,小孢子再生植株倍性的鉴定,以及小孢子再生株纯系的选育进行了研究,获得了下列结果: 1.大白菜游离小孢子培养能在较大基因型范围内成功获得小孢子胚。不同基因型大白菜试材间小孢子胚胎发生能力有很大差异,30个中晚熟大白菜品种有23个产生胚状体,20个早熟大白菜品种中有16个产生胚状体,分别占供试品种的76.6%和80.0%;其中中晚熟大白菜基因型平均产胚量50个·蕾^-1,最高的达100个·蕾^-1,早熟大白菜基因型平均产胚量32个·蕾^-1,最高的达78个·蕾^-1,分别是同种类型中产胚量最低的基因型的25倍和32倍。而这两种类型间的小孢子胚胎发生率无显著差异。 2.小孢子发育时期与花蕾大小有一定关系。供试材料适于游离小孢子培养的花蕾长度为2.0～3.0mm,此长度的花蕾大部分小孢子处于单核靠边期;供体植株在较高营养水平下盛花期时且气温稳定在14～24℃的生理状态最适于游离小孢子培养。 3.NLN培养基适于游离小孢子胚的诱导。在NLN培养基中添加外源激素0.05mg·L^-16-BA+0.1mg·L^-1NAA及0.5gL^-1活性炭琼脂糖悬浮液对小孢子胚发生及发育有一定促进作用;13%的蔗糖能够提供适宜的糖源和渗透压。对离体小孢子高温预处理是诱导胚胎发生的必要条件,而对花蕾低温预处理不能诱发胚的发生。 4.胚状体成苗率与胚胎发育程度密切相关,胚胎越大越容易成苗。小孢子植株主要来源于子叶型胚。适宜的成苗培养基琼脂浓度为1.2%,培养基中添加0.02%NAA有利于小孢子苗根的生长。采用2份泥炭土和1份蛭石混合的基质适合小苗的培养。对小苗注意保湿,移出温室后炼苗一周,可使植株成活率达90～100%。 5.将再生植株移植在田间自然条件下生长正常,经人工观察鉴定,自然加倍率在80%以上。通过对DH植株的观察鉴定选育,育成了一系列优良亲本纯系。