目的:研究不同温度下丝光绿蝇(Lucilia sericata)和大头金蝇(Chrysomya megacephala)蛹期血淋巴可溶性蛋白组成及含量的时间特征,为刑事案件中死后间隔时间(Postmortem interval, PMI)的推断提供科学依据。方法:在河北医科大学校园内以兔内脏诱捕丝光绿蝇和大头金蝇成蝇,带回实验室,在培养箱内连续饲养,以第三代成蝇作为母蝇开始实验。用新鲜猪肉诱成蝇产卵,将所产新鲜卵移置于猪肉上,分别置于24℃、28℃、32℃的培养箱中饲养,相对湿度保持在50%~60%,光周期为12:12小时。当幼虫入土,虫体缩短,对针刺无反应,为蛹期第0天,随机挑取20头,电子天平定时称重,结果用均数±标准差表示,并对不同温度下两种尸食性蝇类蛹重与日龄的关系进行曲线拟合。收集不同温度下两种尸食性蝇类各日龄蛹的血淋巴,按Bradford比色法测定其A595,利用标准曲线方程计算出样品血淋巴中蛋白质浓度,并对不同温度下各蝇种蛹期血淋巴蛋白质浓度与日龄的关系进行曲线拟合。对不同温度下两种尸食性蝇类各日龄蛹的血淋巴进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,分离胶浓度为12%,积层胶浓度为5%。用FR-980生物电泳图像分析系统对凝胶进行扫描,并分析各蛋白质分子量及含量的变化,选择含量随日龄呈规律性变化的蛋白质作为日龄指标,应用SPSS11.5软件建立不同温度、不同蝇种蛹期各蛋白质含量与日龄的回归模型。结果:1蛹重的变化不同温度下丝光绿蝇和大头金蝇蛹重均随日龄的增加而下降,在蛹初期显著下降,之后下降趋于平缓,至蛹期末期下降加快,以三次函数曲线模型的拟合效果最佳;而且温度越高,下降趋势越明显。2蛹期血淋巴蛋白质浓度与日龄的关系不同温度下,丝光绿蝇和大头金蝇蛹期血淋巴蛋白质浓度随日龄均呈逐渐下降趋势,可用线性关系拟合;而且温度越高,下降趋势越明显。建立温度、日龄与蛹期血淋巴蛋白浓度的多元回归模型,表明蛹期血淋巴蛋白质浓度随日龄的增长变化较大。3蛹期血淋巴可溶性蛋白组成的时间特征不同温度下,两种尸食性蝇类各日龄蛹的血淋巴中,都含有丰富的蛋白带,且各蛋白带的含量在生长发育过程中呈现一定的规律变化。3.1丝光绿蝇不同温度下,丝光绿蝇各日龄蛹的血淋巴中均出现17条清晰可见的蛋白带,其分子量在13~230KD之间,其中A带(230KD)、D带(85KD)、L带(28KD)、M带(25KD)和N带(20KD)的含量随着日龄的增加呈逐渐降低的趋势,而且D带是所有蛋白带中含量最高的条带。同时建立了以上各蛋白带含量与日龄的线性回归方程,均有统计学意义。3.2大头金蝇不同温度下,大头金蝇各日龄蛹的血淋巴中均出现15条清晰可见的蛋白带,其分子量在14~230KD之间,其中A带(230KD)、D带(78KD)、G带(38KD)和H带(32KD)的含量随着日龄的增加呈逐渐降低的趋势,而且D带是所有蛋白带中含量最高的条带。同时建立了以上各蛋白带含量与日龄的线性回归方程,均有统计学意义。进一步对有规律性变化的蛋白带含量进行时间动态分析,建立各蛋白质含量与日龄的线性回归方程,表明血淋巴可溶性蛋白的组成及含量变化可有效用于尸食性蝇类蛹期日龄的推断,并进一步用于PMI的推断。结论:1不同温度下丝光绿蝇和大头金蝇蛹重均随日龄的增加而下降,其中在蛹初期显著下降,之后下降趋于平缓,至蛹期末期下降加快,以三次函数曲线模型的拟合效果最佳;而且温度越高,下降趋势越明显。2不同温度下丝光绿蝇和大头金蝇蛹期血淋巴蛋白质浓度随日龄均呈逐渐下降趋势,可用线性关系拟合;而且温度越高,下降趋势越明显。建立了温度、日龄与蛹期血淋巴蛋白浓度的多元回归模型,表明蛹期血淋巴蛋白质浓度随日龄的增长变化较大。3不同温度下,丝光绿蝇各日龄蛹的血淋巴中均出现17条清晰可见的蛋白带,其中A带(230KD)、D带(85KD)、L带(28KD)、M带(25KD)和N带(20KD)的含量随日龄呈逐渐降低的趋势;大头金蝇各日龄蛹的血淋巴中均出现15条清晰可见的蛋白带,其中A带(230KD)、D带(78KD)、G带(38KD)和H带(32KD)的含量随日龄呈逐渐降低的趋势。