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杨树芽是杨柳科(Salicaceae)杨属(Populus)植物中尚未充分发育和伸长的枝条或花,是自然界中广泛存在的一种胶源物质,也是生物活性化合物的来源之一。杨树芽乙醇提取物富含多酚类物质,包括类黄酮、酚酸及其酯类化合物,具有调节免疫、保护肝脏、抗炎和抗菌等功效。由此可见,以杨树芽为原料展开一系列的研究具有重要的意义。但目前已有关于杨树芽的功能性研究鲜少,本文以杨树芽为基础原料,以单因素试验为基础,利用响应面试验设计方法,对杨树芽总黄酮提取工艺进行了优化。用液质联用方法、HPLC-DAD对杨树芽乙醇提取物进行了活性成分的定性定量分析。同时测定了杨树芽乙醇提取物的体外抗氧化活性,通过羟自由基诱导的DNA氧化损伤模型,评价了杨树芽乙醇提取物的抗氧化能力,旨为杨树芽资源的高值化开发利用提供依据。1、本文对原料进行热回流提取,以总黄酮提取率为考察指标,在单因素试验基础上,利用响应面方法优化了杨树芽总黄酮的提取工艺,得出杨树芽总黄酮最佳提取工艺为:提取时间2 h、料液比1:16(g/mL)、乙醇体积分数85%,该条件下杨树芽总黄酮的提取率为13.14%。2、本文采用超高效液相色谱-质谱联用方法、HPLC-DAD测定了杨树芽乙醇提取物中的活性成分。确定了杨树芽乙醇提取物中的10种多酚类化合物,分别是咖啡酸、p-香豆酸、阿魏酸、肉桂酸、槲皮素、山奈酚、异鼠李素、乔松素、白杨素及高良姜素;HPLC-DAD方法的检测线为0.04129μg/mL,定量限为0.1375μg/mL,其精密度、稳定性、重复性和回收率的检验结果均表明该方法准确,可靠。这10中酚类化合物的含量介于0.70 g/kg到36.81 g/kg之间,其中乔松素、白杨素以及高良姜素的平均含量较高;阿魏酸平均含量最低。3、本文对杨树芽乙醇提取物进行了抗氧化活性评价。杨树芽乙醇提取物清除DPPH·的IC50值是0.15 mg/mL,Vc的IC50值是0.023 mg/mL,表明杨树芽乙醇提取物对DPPH·清除能力较强。杨树芽乙醇提取物总抗氧化能力为152.10 gTrolox/kg,表明其抗氧化活性较强。杨树芽乙醇提取物具有络合Fe2+的能力,络合力为271.03gNa2EDTA/kg。说明杨树芽乙醇提取物具有很好的Fe2+络合力。杨树芽乙醇提取物对pBR322DNA的氧化损伤具有保护作用,随着杨树芽乙醇提取物浓度的增加,最高可保护94.42%的pBR322质粒DNA的双螺旋结构免受氧化应激损伤,说明杨树芽乙醇提取物对·OH介导DNA氧化损伤具有显著的保护作用。