目的:①通过体外构建PTEN基因过表达以及构建PTEN基因沉默的足细胞模型,阐明PTEN介导的PINK1/Parkin信号通路在肾小球足细胞线粒体功能障碍中的作用机制。②通过体外构建肾小球足细胞损伤的模型,研究自噬在他克莫司保护嘌呤霉素氨基核苷酸诱导的肾小球足细胞损伤中的作用机制。方法:体外构建PTEN基因过表达以及PTEN基因沉默的足细胞模型和嘌呤霉素基核苷酸损伤的足细胞模型,采用倒置显微镜观察各组足细胞的形态和结构的变化:应用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率;间接免疫荧光检测各组细胞自噬相关蛋白的表达与分布;Western Blot检测各组细胞自噬相关蛋白的表达;透射电子显微镜检测各组细胞自噬体的变化。结果:①当沉默足细胞PTEN基因后,PINK1蛋白的表达被抑制,其下游的蛋白分子Parkin以及LC3-Ⅱ表达也下降;同时,足细胞的凋亡增加,线粒体JC-1单聚体逐渐增多,即线粒体去极化的程度增高,与对照组比较,差异有统计学意义（p<0.05）;此外,在透射电镜下可见到线粒体数量增多、肿胀,线粒体嵴排列紊乱,部分发生空泡化,孤立的双层或者多层膜包裹结构的自噬体数量明显减少;反之,而过表达足细胞PTEN基因后,PINK1蛋白分子及Parkin蛋白分子的表达量增加,足细胞胞质中自噬体的数量明显增加,差异有统计学意义（P<0.05）。②当嘌呤霉素氨基核苷酸损伤足细胞后,可见足细胞连接松散、胞体变小、足突回缩甚至消失;足细胞自噬相关蛋白的表达下降;凋亡率明显增加;自噬体数量明显减少,而他克莫司干预足细胞后可逆转上述的变化。结论:①PTEN基因沉默后,PINK1蛋白表达降低,PINK1自噬通路下游蛋白Parkin和LC3-Ⅱ的活性显著降低,PINK1介导的线粒体自噬水平下降,对损伤线粒体的清除能力降低,导致线粒体损伤的数量增加。而PTEN基因过表达后,PINK1蛋白的表达增加,PINK1自噬通路下游蛋白Parkin和LC3-Ⅱ的活性增强。因此,足细胞特异性过表达PTEN对肾小球足细胞有保护作用,肾小球足细胞可通过PTEN-PINK1/Parkin信号通路调控线粒体自噬的功能障碍。②嘌呤霉素氨基核苷酸可通过抑制自噬、促进凋亡导致足细胞损伤;而他克莫司可通过激活自噬而发挥保护作用。