随着分子生物学的发展及其在肿瘤研究中的应用，目前认为肿瘤的发生是癌基因的活化及肿瘤抑制基因的失活导致细胞凋亡与增殖过程失衡所致，人类肿瘤中最常突变的P53基因及新近发现的P16肿瘤抑制基因，参与细胞周期的调控，并在各种肿瘤的发生和发展中起着重要的作用。为此，本课题拟从分子水平探讨P53，P16基因的改变对食道癌细胞的增殖、凋亡的影响及其他们对食道癌潜在的治疗意义，同时探讨封闭正常的P53蛋白后其对永生化细胞NIH3T3及Rat-1细胞生长增殖影响，从反面进一步验证P53基因在肿瘤形成中的作用。 第一部分 野生型P53基因对肿瘤治疗作用的研究 一．NMB_zA诱发的食管癌细胞系中p53基因的分析： 1．用Southern Blot杂交发现由NMB_zA诱发的人胎食管癌细胞系中P53基因有2.5Kb片段的丢失。 2．对P53基因5、6、7、8、9外显子和相应内含子进行扩增，发现该细胞系中P53有明显结构异常，在P53基因第5、6外显子发生丢失。 3．Northern Blot杂交分析发现NMB_zA诱发的人胎儿食管上皮癌细胞系中没有P53 mRNA的表达。以该细胞系为体外模型进行野生型P53基因的转染。