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目的：1.研究糖基化抑制剂2-脱氧-D-葡萄糖（2-deoxy-D-glucose，2-DG）对乳腺癌细胞增殖及凋亡的影响。2.研究2-DG对肿瘤坏死因子诱导配体（tumorsnecrosisfactor-relatedapotosis-inducingligand，TRAIL）诱导肿瘤细胞凋亡的增强作用。3.探讨2-DG对内质网应激经典蛋白GRP78及凋亡抑制蛋白IAPs表达的影响。4.探讨2-DG对受体相互作用蛋白RIP1表达的影响及下调RIP1后对TRAIL诱导的乳腺癌细胞凋亡的影响。方法：1.MTT法检测不同浓度2-DG(1.25、2.5、5、10、20mmol·L-1)及与TRAIL(200ng·ml-1)合用处理人乳腺癌细胞MDA-MB-231及MDA-MB-43524、48、72h后对细胞存活率的影响。2.溴化丙啶（propidiumiodide，PI）单染法检测2-DG(10mmol·L-1)与TRAIL(200ng·ml-1)对人乳腺癌细胞诱导凋亡的影响。3.AnnexinV-FITC/PI双染法流式细胞术检测2-DG(10mmol·L-1)与TRAIL(200ng·ml-1)对人乳腺癌细胞诱导凋亡的影响。4.利用线粒体膜电位检测（JC-1）试剂盒检测2-DG(10mmol·L-1)与TRAIL(200ng·ml-1)对人乳腺癌细胞早期凋亡的影响。5.Westernblotting法检测2-DG(10mmol·L-1)与TRAIL(200ng·ml-1)处理人乳腺癌细胞MDA-MB-231和MDA-MB-435对凋亡关键蛋白Caspase-3、Caspase-8，凋亡抑制蛋白cIAP1、XIAP，受体相互作用蛋白RIP1以及原型抑制因子IkBα表达的影响。6.利用siRNA下调RIP1后，PI单染法检测对TRAIL(200ng·ml-1)诱导乳腺癌细胞凋亡的影响。结果：1.2-DG与TRAIL对人乳腺癌细胞MDA-MB-231及MDA-MB-435增殖及凋亡的影响1.1MTT法结果显示不同浓度2-DG(0、1.25、2.5、5、10、20mmol·L-1)对人乳腺癌细胞MDA-MB-231及MDA-MB-435有增殖抑制作用，且随着2-DG浓度的增加和作用时间的延长，对人乳腺癌细胞MDA-MB-231及MDA-MB-435增殖抑制作也不断增强。10mmol·L-12-DG作用于人乳腺癌细胞MDA-MB-231、MDA-MB-435的24、48、72h细胞存活率分别为84.96%、60.63%、53.39%和78.16%、53.94%、50.15%。当不同浓度2-DG与TRAIL(200ng·ml-1)联合作用于细胞时，随着2-DG浓度的增加和作用时间的延长，细胞的存活率与单用2-DG相比明显降低。1.210mmol·L-12-DG、200ng·ml-1TRAIL以及合用组处理人乳腺癌细胞MDA-MB-231、MDA-MB-43524h，PI单染法检测结果显示：10mmol·L-12-DG单用组诱导人乳腺癌细胞MDA-MB-231、MDA-MB-435的24h凋亡率分别为5.0%和3.8%，与阴性对照组相比比较无统计学意义，200ng·ml-1TRAIL作用24h诱导的人乳腺癌细胞MDA-MB-231、MDA-MB-435的凋亡率分别为24.0%和22.3%，两者合用后，凋亡率达到34.0%和36.1%。AnnexinV-FITC/PI双染法结果与单染法所得结果一致。2.2-DG与TRAIL对人乳腺癌细胞MDA-MB-231及MDA-MB-435线粒体膜电位的影响实验中采用10mmol·L-12-DG、200ng·ml-1TRAIL以及合用组处理人乳腺癌细胞MDA-MB-231、MDA-MB-43524h，JC-1检测结果显示：单用组没有观察到红色荧光向绿色荧光转变，合用组红色荧光向绿色荧光转变较明显。3.2-DG联合TRAIL对凋亡关键蛋白表达的影响Westernblotting结果显示：空白对照组、10mmol·L-12-DG单用组中没有Caspase-3、Caspase-8的激活，TRAIL单用组与对照组相比有一定的Caspase-3、Caspase-8得激活，二者合用后，Caspase-3、Caspase-8的激活明显增加（图6）。且随着2-DG作用时间的延长，GRP78及TRAIL-R2的表达逐渐增强（图7），cIAP1、XIAP及RIP1的表达都逐渐减弱（图8）。4.下调RIP1表达可增强TRAIL诱导细胞凋亡的敏感性siRNA预处理人乳腺癌细胞MDA-MB-231、MDA-MB-43524h后，westernboltting法检测RIP1表达明显降低。采用同样方法，siRNA预处理细胞24h后，采用10mmol·L-12-DG、200ng·ml-1TRAIL处理细胞24h，PI单染法检测细胞凋亡，结果显示：与阴性对照组相比，siRNA预处理后，合用组细胞的凋亡率明显增加。5.2-DG对核转录因子κB的表达的影响Westernboltting法检测原型抑制因子IκBα的变化，结果显示：采用10mmol·L-12-DG处理人乳腺癌细胞MDA-MB-231、MDA-MB-435，随着2-DG作用时间的延长，原型抑制因子IkBα表达逐渐减弱。结论：1.2-DG对人乳腺癌细胞MDA-MB-231、MDA-MB-435具有增殖抑制作用，且随着浓度的增加和作用时间的延长，细胞存活率逐渐降低，但细胞对2-DG诱导的凋亡不敏感。2.2-DG可以增强TRAIL诱导人乳腺癌细胞MDA-MB-231、MDA-MB-435凋亡的敏感性。3.2-DG可以上调内质网应激反应的标志蛋白GRP78、死亡受体蛋白TRAIL-R2，下调抑制细胞凋亡蛋白cIAP1、XIAP和受体相互作用蛋白RIP1的表达。4.下调受体相互作用蛋白RIP1的表达可以增强TRAIL诱导人乳腺癌细胞MDA-MB-231、MDA-MB-435凋亡的敏感性。