调控ALDHA1活性逆转NSCLC干细胞样细胞介导的EGFr-TKI耐受

来源 :广西医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zqfhj
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:研究全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid,ATRA)能否逆转非小细胞肺癌(non small cell lung cancer,NSCLC)富集干细胞样细胞介导的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitor,EGFR-TKI)耐受,并探讨其潜在的机制。  方法:运用突变扩增系统(amplification refractory mutation system,ARMS)法检测NSCLC细胞的基因突变状态;应用结晶紫染色法检测吉非替尼和ATRA对NSCLC细胞的生长抑制作用;采用流式细胞术检测NSCLC细胞乙醛脱氢酶A1(aldehyde dehydrogenase A1)的活性及CD44的表达。  结果:H1650细胞及高浓度吉非替尼诱导四代后残留活细胞均为EGFR19-Del基因突变;A549细胞及高浓度吉非替尼诱导四代后残留活细胞均未检测到EGFR基因Exon-18、Exon-19、Exon-20、Exon-21外显子突变。短时间高浓度吉非替尼诱导NSCLC细胞不会发生EGFR基因二次突变。以高浓度吉非替尼诱导H1650细胞四代,建立吉非替尼耐受细胞(H1650/GR),与亲代H1650细胞相比,H1650/GR细胞IC50提高1.61倍,耐受吉非替尼能力显著增强(P<0.001),ALDHA1活性和CD44表达也显著升高(P<0.05);高浓度吉非替尼诱导A549四代,建立对吉非替尼耐受细胞(A549/GR),与亲代A549细胞相比,A549/GR细胞IC50提高1.35倍,耐药能力显著增强(P=0.001),A549/GR细胞ALDHA1活性和CD44表达均显著升高(P<0.05)。提示吉非替尼诱导NSCLC四代后富集了干细胞样标记物ALDHA1和CD44。IC20浓度ATRA诱导H1650/GR1/3/5天与未加ATRA组相比,其ALDHA1活性和CD44表达均显著降低(P<0.05)(其中ALDHA1活性至第5天已下降6.81倍,CD44表达比例下降2.44倍),序贯吉非替尼培养72h后,结果发现:与未使用ATRA诱导组相比,ATRA诱导组IC50明显下降(P<0.05)(其中ATRA诱导5天组IC50已下降1.49倍),ATRA诱导组对吉非替尼反应显著提高;IC20浓度ATRA诱导A549/GR1/3/5天与未加ATRA组相比,其ALDHA1活性和CD44表达均显著降低(P<0.05)(其中ALDHA1活性至第5天已下降9.75倍,CD44表达比例下降2.48倍),序贯吉非替尼培养72h后,结果发现:与未使用ATRA诱导组相比,ATRA诱导组IC50明显下降(P<0.05)(其中ATRA诱导5天组IC50已下降1.28倍),ATRA诱导组对吉非替尼反应显著提高。ALDHA1与CD44呈强正相关(P<0.01),提示ALDHA1与CD44可作为NSCLC的共表达干细胞样标记物。  结论:短时间高浓度吉非替尼能诱导NSCLC富集ALDHA1hi CD44hi干细胞样细胞。ATRA通过下调ALDHA1活性可逆转NSCLC干细胞样细胞介导的EGFR-TKI耐受。
其他文献
研究背景:肝细胞癌是最常见的恶性肝胆疾病,每年约有1,000,000人病死,其发病率在逐年增加,2015到2020年将到达一个平台期,据估计每年约有600000新发病例,并且其致死率在所有的癌症中
【一】楔子  瑜帝二年仲秋,开至荼蘼的丹枫染红了倚月城。赫连珏被小兵找到时,战事稍歇,他正在马厩洗马,马的身上有大大小小的伤口。  他听那小兵带着几分忧虑道:“赫连先生,大将军有请。”  赫连珏擦了把马背,他在想这匹烟云照被叶大将军赐名“望乡”,究竟能不能撑到望见家乡的那一刻。只一瞬迷惘,赫连珏便转身大步流星走向大帐,听那小兵好意补了句:“先生,大将军正在气头上……”  观月国东西南北四方各有一位
期刊
001  车停在盘山路上四十分钟后,乔弋蓝的情绪已经从开始时的焦虑、懊恼,过渡到认命般的平静。盘山路通往的小镇,车行稀少,她遇到了一辆大巴,却没能拦停,之后又有一辆白色的小轿车经过,车主是位中年男人,只滑下车窗探头问了问情况,扔下一句“不会修”,便踩了油门离开了。  乔弋蓝站在路边的树荫下,八月末的天气,山上的温度比市内略低,树影婆娑。母亲也从车上下来,焦灼的目光里显而易见地含着歉意——如果不是为
期刊