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目的使用不同方法以激活Wnt/β-catenin通路,观察其对骨形成和骨愈合的影响,并探讨其机制。方法1.制作大鼠股骨骨折模型,将SB-415286注射于骨折端。采用western blotting方法检测骨痂内β-连环蛋白(β-catenin)、核增殖抗原(PCNA)、骨形态发生蛋白-2(BMP-2)的蛋白表达;免疫组化检测成骨细胞增殖和成骨作用;使用Micro-CT测量骨痂骨量和骨密度;术后3周,骨折标本行生物力学测试。2.构建表达mi R-199a基因的慢病毒载体,体外预感染MC3T3-E1细胞,检测其感染效率。将慢病毒注射于萎缩性骨不连骨折端,采用实时定量RT-PCR的方法检测其对骨痂内β-catenin基因表达的影响。使用组织学、免疫组化、MicroCT、放射学方法检测其对萎缩性骨不连愈合的影响。3.建立大鼠卵巢切除骨质疏松模型,经尾静脉注射慢病毒载体,取股骨做相应检测。使用Micro-CT检测右股骨颈的骨微结构和骨量变化;检测右股骨干生物力学变化。4.制作大鼠右股骨开放骨折模型,术后注射Sclerostin单克隆抗体(Scl-Ab)。观察其对骨折愈合的影响;并观察其对左侧完整股骨的作用。结果1.SB-415286促进了β-catenin、PCNA、BMP-2的蛋白表达;促进成骨细胞增殖和成骨作用;提高骨痂骨量和骨密度;改善骨痂的生物力学性质,促进了骨折愈合2.MC3T3-E1细胞容易被所构建的慢病毒感染;Mi R-199a基因在大鼠体内可稳定表达;慢病毒注射促进了萎缩性骨不连愈合。3.慢病毒载体尾静脉注射改善了治疗组右股骨颈的骨微结构,增加了骨量;治疗组的股骨干生物力学指标得到提高。4.Scl-Ab治疗增加骨痂组织内PCNA和BMP-2的表达;减少软骨组织的生成;增加骨痂组织的骨量和生物力学特性,促进了开放性骨折愈合。此外,Scl-Ab治疗增加了左侧完整股骨的骨合成作用。结论实验证明,激活Wnt/β-catenin信号通路可以促进骨折的愈合。综合考虑其安全性及效果,使用Sclerostin单克隆抗体拮抗Wnt/β-catenin信号通路中的Sclerostin信号靶点,是一个安全有效、切实可行的方法。Sclerostin抗体可以作为一个非侵入性治疗措施,用于开放性骨折的治疗。