喜树碱是一种色氨酸-萜烯类生物碱,功能抗癌、清热、杀虫,是一种极有开发前景的植物药.由于资源有限,且化学合成困难、成本高,通过植物细胞培养生产次生代谢物质-喜树碱将是一个很好的选择.该文以喜树(Camptotheca acuminataDecsne)幼嫩叶片为材料,诱导和筛选了愈伤组织,初步研究了固体培养条件下激素及一些理化因子对喜树细胞生长、生理生化特性的影响,使喜树培养细胞生长速度有明显提高,为进一步研究积累了资料.具体实验结果如下:不同种类、不同浓度的激素及其组合对细胞生长的效应均不相同,选用不同培养基对喜树愈伤组织诱导和继代培养的基础上,进行愈伤组织培养,使其进一步分化,用薄层层析法检测其是否含有喜树碱.得出喜树愈伤组织诱导及增殖的最佳培养基为:MS+NAA0.2 mg·L<-1>+6-BA1.0 mg·L<-1>.在喜树细胞固体培养中,适宜的接种量为4g鲜重/50ml培养基;蔗糖的最佳添加量为30g/L;作为碳源,葡萄糖的效果优于蔗糖,随着葡萄糖的浓度升高,细胞生长速率呈上升趋势,且在葡萄糖浓度为30g/L时最有利于细胞生长;而椰乳与蔗糖却对细胞生长影响差不多.愈伤组织培养细胞生长周期均为36天左右,细胞增殖曲线为"S"型,可大致分为延迟期、指数生长期和下降期三个时期.在不同培养基中,喜树愈伤组织的可溶性蛋白质含量与喜树碱变化曲线相似,过氧化物酶、超氧化物歧化酶的活性,三种酶活性的变化均与光照条件下喜树细胞生长速率相一致.蛋白质组分及过氧化物酶、超氧化物歧化酶和结果表明,在愈伤组织培养周期中,它们发生的变化与细胞生长速度慢时有明显区别,显示了细胞生长和生理生化特性之间的相关性.为利用的组织培养,进一步进行细胞培养获得喜树碱打下基础.