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目的：探讨miR-133a、miR-326对肝癌HepG2细胞5-氟尿嘧啶、阿霉素和顺铂化疗药物敏感性的影响及作用机制。方法：生物信息学软件预测ABCC1基因3′UTR潜在的miRNA结合位点；双荧光素酶报告基因验证miR-133a、miR-326对ABCC1的靶向作用；实时定量RT-PCR检测miRNAs的转染效率及ABCC1mRNA表达水平；Western blot检测ABCC1蛋白表达水平；MTT法检测细胞对三种化疗药物的敏感性。结果：生物信息学预测软件显示ABCC1基因3′UTR存在一个miR-133a的结合位点和两个miR-326的结合位点。miR-133a的潜在保守结合位点位于ABCC13′UTR366-372nt，miR-326的潜在结合位点位于ABCC13′UTR3-9nt和1614-1621nt。实时荧光定量RT-PCR结果显示，在miR-133a或miR-326mimics转染的HepG2细胞中，miR-133a或miR-326的表达水平显著升高（MOCK、NC、miR-133a和miR-326组的相对活性倍数分别为1、0.98、14.42和14.83）；与NC转染组相比，miR-133a或miR-326mimics转染组的ABCC1表达水平显著降低（MOCK、NC、miR-133a和miR-326组的相对活性倍数分别为1、1.03、0.69和0.78）。Western blot结果显示，与NC转染组相比，miR-133a或miR-326mimics转染组的ABCC1蛋白表达水平显著降低（MOCK、NC、miR-133a和miR-326组的ABCC1/β-actin灰度比值分别为2.25、2.18、0.85和0.98）。MTT检测结果显示，与未处理组细胞及NC转染组相比，miR-133a或miR-326mimics转染组的HepG2细胞对三种化疗药物的敏感性均增强，其中5-FU处理的未转染组、NC组、miR-133a转染组和miR-326转染组的IC50分别为3026.7±236.7μM、2074.8±173.1μM、106.8±18.7μM和864.8±20.5μM；ADM处理的未转染组、NC组、miR-133a转染组和miR-326转染组的IC50分别为0.86±0.15μM、0.76±0.05μM、0.49±0.12μM和0.55±0.04μM；DDP处理的未转染组、NC组、miR-133a转染组和miR-326转染组的IC50分别为21.70±5.28μM、20.15±3.24μM、14.00±2.32μM和16.19±3.18μM。双荧光素酶报告基因载体验证实验结果表明：与miRNA阴性对照(NC)+野生型ABCC13′UTR载体共转染组比较，miR-133a mimics+野生型ABCC13′UTR载体共转染组荧光素酶活性显著降低（将未转染组设定为1，NC组双荧光素酶活性倍数为1，miR-133a与野生型载体共转染组的双荧光素酶活性倍数为0.49），与NC+突变型ABCC13′UTR载体共转染组比较，miR-133a mimics+突变型ABCC13′UTR载体共转染组荧光素酶活性倍数为0.98，无明显变化；miR-326mimics+野生型ABCC13′UTR载体共转染组荧光素酶活性同样显著降低（将未转染组设定为1，NC组双荧光素酶活性倍数为0.99，miR-326与野生型载体共转染组的双荧光素酶活性倍数为0.50），与NC+突变型ABCC13′UTR载体共转染组比较，miR-326mimics+第一个位点突变的突变型ABCC13′UTR载体1共转染组荧光素酶活性倍数为0.38，有极显著统计学差异，说明第一个位点不保守。miR-326mimics+第二个位点突变的突变型ABCC13′UTR载体2共转染组荧光素酶活性倍数为0.79，有显著统计学差异，说明第二个位点相对保守。miR-326mimics+两个位点同时突变的突变型ABCC13′UTR载体3共转染组荧光素酶活性倍数为0.91，没有统计学差异。结论：1. miR-133a和miR-326能够靶向ABCC1基因，下调HepG2细胞ABCC1mRNA和蛋白的表达水平；2. miR-133a和miR-326能够增强HepG2细胞对三种化疗药物的敏感性；3. miR-133a和miR-326对化疗药物敏感性的增强效应可能与对ABCC1基因的靶向下调有关。