紫杉醇在青光眼滤过手术中抗增殖作用的研究

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目的:青光眼滤过手术是治疗在青光眼药物和激光治疗不能控制眼压时的重要手段,尽管药物和抗青光眼手术已有很大的发展,但青光眼滤过手术术后失败率仍较高,其失败的主要原因是手术区滤过口处成纤维细胞增殖,瘢痕形成而使伤口愈合。一些抗瘢痕形成药物已用于青光眼滤过手术的实验和临床研究,对改善滤过泡、降低眼内压、提高手术成功率起到一定的作用,但也有一定的副作用及并发症,甚至有的药物有严重的毒性作用,在临床上广泛应用受到一定的限制,故需探索一种疗效高、毒副作用小的抑制青光眼滤过术后瘢痕形成的辅助药物。紫杉醇(paclitaxel 商品名:taxol)是一种新型抗微管药物,它抑制细胞的有丝分裂,并干扰细胞游走、细胞趋化性及细胞内运输等微管功能。最早应用于妇科肿瘤,并相继应用于肺癌、食管癌等。但在眼科的研究报道较少,本研究将其应用于青光眼滤过手术中和术后,研究其降眼压效果、功能性滤过泡的百分率、毒副作用,通过组织病理学和免疫组织化学的方法研究紫杉醇在青光眼滤过手术后抑制成纤维细胞的增殖作用,滤过道胶原纤维的种类和形态,旨在探讨紫杉醇在青光眼滤过手术中抑制瘢痕形成的应用价值。 方法:1.实验动物及分组将30只新西兰大耳白兔随机分为三组:对照组、实验Ⅰ组、实验Ⅱ组,双眼均按标准小梁切除术操作,对照组术中巩膜瓣下应用0.2mg/ml丝裂霉 中文摘要素(mitomyein MMC)5分钟,实验I组术中瓣下应用0.3m留ml紫杉醇5分钟,实验n组除术中应用0.3m留ml紫杉醇5分钟外,术后第3天、6天、9天结膜下注射紫杉醇30卜g。 2.术后第4天、7天、14天、28天、60天各组均进行裂隙灯显微镜检查,计算各组各阶段角膜上皮损伤的比率、功能性滤过泡的比率、结膜伤口漏的阳性率。 3.测量眼压术前及术后第4天、7天、14天、28天、60天各组均测量眼压,比较实验组和对照组在各时间段的眼压有无差异。 4.视网膜电图(eleetroretinogram ERG)的检查术前及术后第4天、7天、14天、28天各组均行视网膜电图检查。记录视杆细胞反应a波、b波振幅,最大混合反应a波、b波振幅,将各组术后各阶段ERG的a波、b波振幅与各组术前进行比较;记录30Hz闪烁光反应的振幅,将术前和术后各时间段的振幅进行比较。 5.组织病理学术后第4天、7天、14天、28天、60天各组均随机取2只兔,摘除眼球,将手术部位固定,制成石蜡切片,做H.E染色,光镜下观察滤过道开放情况;经苦味酸一天狼星红染色,在偏振光显微镜下观察术后滤过道胶原形成情况;做增殖细胞核抗原(proliferative eezl nueleusantisen PCNA)染色,计算术后各阶段滤过道处5个高倍视野阳性细胞核的数量,做统计学分析。 结果:1滤过泡形态的比较术后第4天、7天三组均为功能性滤过泡,术后第14天、28天、60天实验I组较对照组功能性滤过泡的比率低,实验11组较对照组功能性滤过泡比率高。侧.....州.....口..门 2中文摘要 2眼压变化对照组和实验I组、实验H组三组术前眼压值均无显著性差异(尸>0 .05);术后第四天三组之间亦无显著性差异(尸>0 .05),术后第7天、14天、28天、60天实验I组和对照组之间均无显著性差异(尸>0 .05),实验n组和对照组之间均有显著性差异(尸<0 .05),实验I组和实验11组之间均有显著性差异(尸<0.05)。 3滤过道开放比率的比较各组滤过道开放比率和病理组织学H.E染色所得结果基本一致。 4角膜上皮细胞损伤及结膜伤口漏的比较实验I组和实验H组在术后第4、7天均较对照组角膜上皮损伤率低,实验I组较实验n组损伤率低;术后第14天各组损伤的角膜上皮修复。术后第4天对照组有1例发生结膜伤口漏,两个实验组未发现结膜伤口漏。 5术前术后ERG的变化将各组术后第4、7、14、28天检测的ERG的a波、b波与各组术前进行比较,均无显著性差异(P>0 .05)。30Hz闪烁光反应的振幅在术前和术后各时间段之间进行比较,其差异无显著性(P>0.05)。 6组织学观察 6.1 H.E染色:术后第4天三组滤过区均可见较多的炎性细胞浸润,术后第7天炎性细胞均明显减少。术后第4、7天三组滤过道均开放,术后第14、28、60天实验I组滤过道开放比率较对照组低;实验n组较对照组高。 6.2苦味酸一天狼星红染色:术后滤过区主要以111型胶原为主;术后第4、7天伤口处未见m型胶原产生,术后第14天对照组伤口处有较粗大的m型胶原,实验I组有较松散的111型胶原,实验n组有零碎的111型胶原产生。 中文摘要 6.3免疫组织化学染色术后第4天各组PCNA阳性细胞数量无显著性差异(尸>0 .05),术后第7、14、28天实验I组和对照组PCNA阳性细胞数无显著性差异(P>0 .05),实验n组比对照组PCNA阳性细胞数少,统计学有显著性差异(尸<0 .05)。术后60天未见明显的成纤维细胞增生。 结论 1紫杉醇在青光眼滤过手术中有抑制成纤维细胞增殖的作用。 2紫杉醇应用于青光眼滤过术中及术后,能有效降低眼
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