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目的建立Cbp过表达及Cbp棕榈酰化的T系白血病Jurkat细胞裸鼠模型,研究Cbp过表达及棕榈酰化对CD59介导的裸鼠T系白血病.1urkat细胞跨膜凋亡信号转导的作用机制,为T系白血病的临床靶向治疗研究提供理论基础。方法构建Cbp-EGFP慢病毒载体和Cbp棕榈酰化位点突变EGFP (Cbp-m-EGFP)慢病毒载体,转染T系白血病Jurkat细胞,建立了稳定表达Cbp-EGFP和Cbp-m-EGFP的Jurkat田胞系。激光共聚焦显微镜观察细胞的病毒转染效率及Cbp分子与CD59分子的细胞内定位。构建裸鼠模型：32只BALB/c-nu雌性小鼠随机分为空白对照组、正常Jurkat田胞对照组(正常对照组)、Cbp过表达组和Cbp棕榈酰化位点突变组(Cbp-m组)；小鼠体质量称量及外周血白细胞计数；激光共聚焦显微镜观察小鼠外周血中Jurkat细胞的凋亡情况；流式细胞术检测小鼠骨髓和外周血中Jurkat细胞的凋亡水平；ELISA检测小鼠血清中IL-2水平；HE染色观察小鼠肝脏、脾脏的病理变化；免疫组化法检测小鼠肝脏、脾脏中Fassurvivin的表达水平。结果①激光共聚焦显微镜观察可见Jurkat细胞的病毒转染效率高达100%,Cbp分子与CD59分子共定位于Jurkat田胞膜的脂筏区域。②动物模型构建成功,与Cbp-m组小鼠相比,Cbp过表达组小鼠体质量较大(P<0.05),外周血白细胞数较少(P<0.05)差异有统计学意义。③激光共聚焦显微镜观察,Cbp过表达组和Cbp-m组小鼠外周血中均可见表达绿色荧光蛋白的Jurkat细胞。④流式细胞术检测结果显示,与Cbp-m组相比,Cbp过表达组小鼠骨髓和外周血中Jurkat细胞的凋亡水平升高(P<0.05)⑤ELISA结果显示,与Cbp-m组相比,Cbp过表达组小鼠血清中IL-2水平降低(P<0.05)。⑥HE染色可见小鼠肝小叶中央静脉及汇管区内细胞排列不规则,脾脏组织细胞排列不规则,可见Jurkat细胞浸润。⑦免疫组化结果显示,与Cbp-m组相比,Cbp过表达组小鼠肝脏、脾脏中Fas表达水平升高(P<0.05),survivin表达水平降低(P<0.05)。结论 本课题通过构建裸鼠动物模型,经体内实验证实T系白血病Jurkat细胞CD59GPI锚固蛋白可通过Cbp分子进行跨膜凋亡信号转导,过表达的Cbp能够促进Jurkat细胞凋亡,Cbp棕榈酰化位点突变后Jurkat细胞的凋亡效率下降。该研究不仅为Cbp分子与CD59分子在T细胞凋亡信号转导中的作用机制提供了新思路,并为急性T系白血病的靶向治疗提供了新靶标。