论文部分内容阅读
目的：检测恶性黑素瘤、色素痣及正常组织中BRAF基因表达，分析BRAF基因的表达与恶性黑素瘤临床表型的关系及其意义，探讨其与恶性黑素瘤形成及预后的关系，以期找到一个用于疾病早期诊断及判断预后的新指标。同时探讨从恶性黑素瘤石蜡包埋组织中提取RNA并进行实时荧光定量的可行性。方法：收集2007-2012年新疆维吾尔自治区人民医院病理科、皮肤科确诊的74例恶性黑素瘤石蜡包埋组织，并整理分析临床病理资料，并选取了35例色素痣及46例正常包皮的石蜡包埋组织。运用SYBR Green Real-time PCR（qRT-PCR）方法检测BRAF基因在恶性黑素瘤织、色素痣及正常皮肤组织中的相对表达量2-ΔCt,分析其mRNA表达与恶性黑素瘤临床表型关系。采用琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度仪检测恶性黑素瘤石蜡包埋组织提取的RNA质量，运用标准曲线及溶解曲线进行实时荧光定量方法可行性分析。统计学分析采用SPSS17.0软件。结果：1）74例恶性黑素瘤患者维吾尔族34例（45.9%），汉族40例（54.1%）；男性39例（52.7%），女性35例（47.3%），男女之比：1.11:1；平均年龄55.6±14.3岁，其中≦45岁11例（14.9%），46-59岁20例（27.0%），≥60岁43例（58.1%）；原发部位位于皮肤47例（63.5%），粘膜24例（32.4%），其它3例（4.1%）；其中原发于皮肤的47例患者中33例为肢端黑素瘤（70.2%）。2)维吾尔族、汉族恶性黑素瘤患者BRAF基因的表达水平（0.377±0.167）明显高于色素痣（0.159±0.167）、正常皮肤组织（0.134±0.050）(p<0.01)。3）新疆维吾尔族、汉族恶性黑素瘤患者性别、年龄、民族、发病部位、淋巴结转移等BRAF基因mRNA表达水平无统计学差异（P>0.05）。4）恶性黑素瘤石蜡包埋组织中提取的RNA可进行后续实时荧光定量PCR反应，实时荧光定量PCR检测结果显示溶解曲线呈单峰，目的基因与内参基因扩增效率基本一致。结论：1）新疆地区恶性黑素瘤发病年龄以45岁以上为主，无明显性别差异，好发部位为肢端。2）BRAF基因高表达可能参与了恶性黑素瘤的发生发展。