RNA干扰技术抑制基质金属蛋白酶-26表达对人肺癌A549细胞的影响

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基质金属蛋白酶-26(MMP-26)是参与细胞外基质降解的重要分子,已在多种肿瘤中检测到MMP-26的高表达,并发现与肿瘤细胞的侵袭和转移密切关联。为明确MMP-26在肺癌细胞系A549中的作用,本实验采用RNA干扰技术,构建能产生siRNA的质粒载体pSUPERIOR.PURO-MMP-26,并通过Lipofectamine?脂质体法转染A549细胞。用RT-PCR、Western Blot观察RNA干扰质粒对A549细胞中MMP-26基因转录表达的影响;观察转染干扰质粒pSUPERIOR.PURO-MMP-26后细胞形态变化,并用细胞划痕实验研究其对A549细胞迁移能力的影响。结果表明,RNA干扰质粒pSUPERIOR.PURO-MMP-26能特异性抑制A549细胞中MMP-26基因的表达,对A549细胞形态无显著影响,但对A549细胞的迁移能力有显著抑制,这说明,沉默MMP-26基因表达可降低A549细胞的迁移侵袭能力,有效抑制A549细胞的转移。这一结果也反过来证明MMP-26的高表达增强了A549细胞的迁移侵袭能力。因此我们认为MMP-26基因有可能成为肺癌转移标志物和治疗的靶基因。
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