黑龙江省洋葱紫斑病病原菌分离鉴定及苗期接种方法筛选

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洋葱紫斑病是洋葱生长期的重要病害之一,该病的发生导致洋葱叶大面积坏死,继而造成洋葱产量及品质下降。本试验从黑龙江省哈尔滨市、齐齐哈尔市、牡丹江市等地采集病样,在病健交界处采用组织分离法分离致病菌,通过回接鉴定确定致病菌株,对其进行菌落及孢子形态学观察和ITS序列分析;并对其生物学特性和苗期最佳接种方法进行研究,筛选出菌丝生长及产孢的最佳培养条件和一套简便易行的洋葱紫斑病苗期接种方法。本试验主要结论如下:(1)本试验从黑龙江省三地采集病样,在感病部位病健交界处进行常规组织分离与单孢纯化,获得H、Q、M 3种纯化菌株。将H、Q菌株回接进行致病力测试,观察病症并重新分离致病菌,观察致病菌形态学特点,结合r DNA ITS序列分析,与链格孢属真菌相关描述进行对照,确定两种致病菌为同一种菌,即葱链格孢菌(Alternaria porri(Ell1)Ciferi)。(2)在实验室条件下对病原菌的生物学特性进行了研究,结果表明,菌丝生长最佳碳源为麦芽糖,最佳氮源为氯化铵,在32℃时菌丝平均生长速率最大,最适生长p H为7,光照条件为12h光/12h黑暗交替培养,一定时间的光照对洋葱紫斑病病菌生长有促进作用。致病菌产孢方面,最佳产孢条件为:碳源为葡萄糖,氮源为氯化铵,温度方面,20~26℃为病原菌产孢的适宜温度范围,最佳产孢温度为24℃,55℃为致病菌孢子致死温度,病原菌在连续黑暗条件下产孢最多,适宜该菌产孢的p H值是8,即该菌在弱碱性的环境产孢最多。(3)正交实验结果显示,洋葱苗期感病最佳接种方法组合为采用针刺法,5叶期接种,接种后24℃恒温保温。
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