miR-320c、msi-2在急性白血病患者中的表达及意义

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目的:本课题主要通过检测不同类型及不同治疗时期的急性白血病(Acute leukemia,AL)患者中miR-320c、musashi-2(msi-2)的表达水平,并探讨其表达水平与白血病的发生、发展及预后的关系,有望为临床上对AL的诊断、治疗及预后评估等提供新的方法及实验室依据。方法:1.研究对象:实验组150例选取自2017年1月至2018年1月在赣南医学院第一附属医院血液科住院的急性白血病(Acute Leukemia,AL)患者,其中急性淋巴细胞白血病(Acute Lymphoblastic Leukemia,ALL)患者46例,急性非淋巴细胞白血病(Acute Non-Lymphocytic Leukemia,ANLL)患者104例。按照疾病治疗的不同时期将实验组分为初治组、难治复发组及缓解组,对照组20例选自同期入院的非恶性血液病患者。同时收集所有实验组及对照组患者的骨髓标本。2.研究方法:采用分离液分离骨髓单个核细胞。采用实时荧光定量PCR(Real-timequantitativePCR,RT-qPCR)检测骨髓单个核细胞中miR-320c基因与msi-2 mRNA的表达水平。蛋白质免疫印迹法(Western blot,WB)检测骨髓单个核细胞中msi-2蛋白的表达水平。3.统计学方法:数据采用SPSS18.0统计软件分析。采用Mann-Whitney U秩和检验比较组间miR-320c与msi-2表达水平的差异,miR-320c与msi-2表达水平与临床资料两变量间分别行Spearman秩相关性分析。用Kaplan-Meier法进行生存分析,用log-rank检验比较生存率。P<0.05为差异有统计学意义。结果:1.miR-320c在初治组、难治复发组中的表达与对照组比较差异有统计学意义(P=0.047,P=0.01);缓解组与对照组比较差异无统计学意义(P=0.676);初治组、难治复发组与缓解组比较差异有统计学意义(P=0.000,P=0.000);初治组与难治复发组比较差异无统计学意义(P=0.911).msi-2 mRNA在初治组、难治复发组中的表达与对照组比较,差异有统计学意义(P=0.015,P=0.001);缓解组与对照组比较差异无统计学意义(P=0.629);初治组、难治复发组与缓解组比较差异有统计学意义(P=0.009,P=0.000);初治组与难治复发组比较,差异无统计学意义(P=0.076);msi-2蛋白在四组中的表达结果与msi-2 mRNA表达结果一致。2.miR-320c在初治ALL中的表达与ANLL比较差异无统计学意义(P=0.891);miR-320c在初治ANLL各亚型中的表达比较差异无统计学意义(P>0.05).msi-2 mRNA在初治ALL中的表达与ANLL比较差异无统计学意义(P=0.062);msi-2 mRNA在初治ANLL各亚型中表达比较差异不具有统计学意义(P>0.05),msi-2蛋白在ALL、ANLL中的表达结果与msi-2 mRNA表达结果一致。3.初治AL患者miR-320c基因、msi-2 mRNA的表达水平与患者性别、年龄、骨髓NPM1基因均无关联性(P>0.05)。miR-320c与患者外周血WBC、HGB、PLT、LDH、TAM、WT1基因、铁蛋白及骨髓幼稚细胞比例无相关性(P=0.049),但与外周血β2微球蛋白(β2-MG)呈负相关(P<0.05)。msi-2 mRNA与患者外周血WBC、HGB、LDH、TAM、β2-MG、WT1基因、铁蛋白及骨髓幼稚细胞比例无相关性(P>0.05),但与外周血PLT计数呈正相关(P=0.012)。4.miR-320c在完全缓解组(CR组)中的表达量与非完全缓解组(NR组)比较差异无统计学意义(P=0.881).msi-2在CR组中的表达量与NR组比较差异无统计学意义(P=0.923).AL中miR-320c基因与msi-2 mRNA的表达不存在相关关系(r=-0.170,P=0.361).5.miR-320c高表达组患者生存率与低表达组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论:1.miR-320c的表达水平可为AL患者的诊断及评估疾病状态提供依据。2.msi-2的表达水平可为AL患者的诊断及评估疾病状态提供依据。
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