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目的:子宫内膜癌(Endometrial cancer,EC)是发展中国家最为常见的女性生殖系统恶性肿瘤之一,术后的局部复发以及远处转移已经成为危害患者生存质量的主要问题。从而对子宫内膜癌发生发展的研究显得迫切的重要。近几年课题组所在实验室一直从事子宫内膜癌的发生发展的分子机制研究,已经证实KLF12调控子宫内膜癌细胞部分生物学行为。目前KLF12如何调控靶基因参与了子宫内膜癌的生长调控,尚不清楚。本实验通过检测出KLF12调控下游靶基因,探究KLF12如何参与子宫内膜癌的生长调控机制,对于防治子宫内膜癌术后复发研究具有重要意义。方法:1、通过Western bloting、q-PCR检测正常子宫内膜细胞及子宫内膜癌细胞的白分析,了解KLF12在子宫内膜癌细胞中的表达情况;2、根据基因芯片数据分析,了解KLF12的过表达相关基因的改变,从相关靶基因中筛选出特异的靶基因;3、通过RT-q PCR技术对相关靶基因的差异分析,得出相关KLF12的靶基因的mRNA表达水平;4、通过Western bloting、q-PCR检测,检测子宫内膜癌细胞和人子宫内膜细胞中KLF12表达水平以及KLF12的相关靶基因蛋白和m RNA水平的表达差异;5、通过Western bloting,q-PCR检测KLF12沉默及过表达影响子宫内膜癌细胞对KLF12及其靶基因的表达水平,沉默CDH11影响子宫内膜癌细胞对KLF12及其靶基因的表达水平,沉默过表达KLF12子宫内膜癌细胞的CDH11基因后KLF12及其靶基因的表达水平;6、通过cck-8实验分析KLF12及特异性靶基因在在子宫内膜癌细胞中发挥具体的生物学作用。结果:(1)通过Western bloting,q-PCR检测子宫内膜癌细胞及人子宫内膜细胞,在子宫内膜癌细胞发现KLF12过表达*(P<0.05)。(2)基因芯片结果分析,发现KLF 12的过表达导致了含有特异序碱基序列的启动子的靶基因差异:ARHGDIB、BLVRA、CDH11、CDK2AP2、CLEC2D、CTNNB1、FABP6、GP2、LRAP、MCM7、MST1、MT1H、NET1、PAGE1、PGCP、RPL37、SCAMP1、TFF1、TMEM195、ZNF581,上述基因的启动子受KLF 12调控。(3)通过q RT-PCR技术对相关靶基因的差异分析,得出相关KLF12的靶基因的mRNA表达水平;KLF12过表达导致下游靶基因CDH11、CAEC2D、MST1的过表达,KLF12过表达下调下游靶基因ARHGDIB、BLVRA、CDK2AP2、FABP6、MCM7、MT1H、NET1、PAGE1、PGCP、RPL37、SCAMP1、ZNF581,KLF12过表达与下游靶基因CTNNB1,TMEM195无统计学意义;KLF12过表达调控下游靶基因与基因芯片检测一致的有:ARHGDIB、BLVRA、CDK2AP2、CLEC2D、FABP6、MCM7、MT1H、CDH11、MST1,KLF12过表达调控下游靶基因与基因芯片检测不一致的有:NET1、PAGE1、PGCP、SCAMP1、ZNF581。(4)通过Western bloting,q-PCR检测,沉默IK细胞后的KLF12蛋白,CDH11相对表达量,前后结果相比较,具有统计学差异,**(P<0.01);沉默IK细胞CDH11基因后的细胞的KLF12、CDH11相对表达量,前后结果相比较CDH11发生统计学差异**(P<0.01);前后结果相比较KLF12无统计学差异P>0.05;过表达IK细胞后的KLF12、CDH11的蛋白相对表达量,前后结果相比较,均发生统计学差异**(P<0.01);过表达KLF12的IK细胞基因沉默CDH11基因,前后KLF12、CDH11的蛋白相对表达量,结果相比较CDH11表达发生统计学差异,**(P<0.01);前后结果相比较KLF12无统计学差异P>0.05;(5)过表达KLF12的IK细胞与沉默CDH11已过表达KLF12的IK细胞CCK-8细胞增殖能力统计学产生显著差异**(P<0.01)。结论:(1)KLF12在子宫内膜癌细胞中高表达。(2)KLF12调控下游具有特异启动子的靶基因(ARHGDIB,BLVRA、CDH11、CDK2AP2、CLEC2D、CTNNB1、FABP6、GP2、LRAP、MCM7、MST1、MT1H、NET1、PAGE1、PGCP、RPL37、SCAMP1、TFF1、TMEM195、ZNF58)。(3)KLF 12上调子宫内膜癌CDH11蛋白表达,KLF 12促进CDH11在子宫内膜癌细胞增殖生物学行为。