荧光体1,8-萘酰亚胺衍生物的设计、合成及其对半胱氨酸的识别研究

来源 :西华大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:CayleeDak_83
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荧光分子探针检测技术由于具有操作简单、选择性高、灵敏度高、检测限低、外界干扰小以及在生命体系里对目标产物无损伤性等优点成为了极具吸引力的检测方法。巯基氨基酸水平异常与多种疾病有关,目前巯基氨基酸的检测还存在着一些局限性。因此,研究出能检测巯基氨基酸的荧光探针就显得十分必要。1,8-萘酰亚胺衍生物是荧光素中荧光较为明亮,波长较短的一类,其在荧光探针方面的应用在国内外均有大量报道。本论文以苊为原料,成功合成了61个1,8-萘酰衍生物。研究了该类化合物的荧光性能及其作为半胱氨酸含量测定的荧光探针的可能性。具体内容如下:首先,以苊为原料,先后经过硝化反应、氧化反应、氨解反应、还原反应、关环反应等,最终得到21个硝基萘酰亚胺衍生物、21个氨基萘酰亚胺衍生物、19个马来酰亚胺萘酰亚胺衍生物。61个化合物经光谱红外(IR)、核磁氢谱(~1HNMR)结构分析,以及紫外光谱(UV)性能测试。紫外光谱分析表明:N-取代基对最大吸收波长无明显影响。其次,对产物进行荧光光谱(FL)的性能测试,测试表明:硝基萘酰亚胺衍生物无荧光,氨基萘酰亚胺衍生物有强烈黄色荧光,马来酰亚胺萘酰亚胺衍生物(探针)有微弱蓝色荧光。在19个马来酰亚胺萘酰亚胺衍生物探针中,7个探针对半胱氨酸(Cys)溶液有荧光点亮效应,表明这些探针有检测半胱氨酸的潜力。最后,对这7个产物的荧光性能进一步研究:(1)加入21种氨基酸作为的干扰项测试,探究了探针对半胱氨酸检测的选择性;(2)在8组不同pH值下测试荧光强度,探究了探针的容忍度;(3)检测探针与半胱氨酸的时间荧光强度,探究了探针与半胱氨酸的时效性;(4)检测了探针溶液荧光强度随氨基酸浓度的变化,探究了探针的的灵敏性。通过以上实验发现探针对半胱氨酸表现出了较好的灵敏性和选择性。Hela细胞荧光成像探究了7个荧光探针应用于细胞内半胱氨酸的检测,筛选出了在生物检测方面有较大潜力的探针。
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