【摘 要】
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目的:观察肝细胞脂变过程中甲状腺素受体β1(TRβ1)及SUMO蛋白表达的变化情况,探讨TRβ1类泛素化修饰是否参与肝脂沉积过程,以期为临床NAFLD发病机制提供新的切入靶点。方法:1.免疫组化证实NAFLD人的肝组织中TRβ1与SUMO蛋白表达情况;2.体外培养人正常肝细胞WRL68细胞,用不同浓度的游离脂肪酸(Free fatty acid,FFA)(油酸:棕榈酸=2:1)诱导WRL68细胞脂
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目的:观察肝细胞脂变过程中甲状腺素受体β1(TRβ1)及SUMO蛋白表达的变化情况,探讨TRβ1类泛素化修饰是否参与肝脂沉积过程,以期为临床NAFLD发病机制提供新的切入靶点。方法:1.免疫组化证实NAFLD人的肝组织中TRβ1与SUMO蛋白表达情况;2.体外培养人正常肝细胞WRL68细胞,用不同浓度的游离脂肪酸(Free fatty acid,FFA)(油酸:棕榈酸=2:1)诱导WRL68细胞脂肪变,选出最佳诱导浓度及时间,建立脂肪肝细胞模型;3.将WRL68细胞分为两组:正常对照组(Control组)及FFA诱导脂肪肝细胞组;分别于6H及24H用自动生化仪检测细胞中甘油三脂及胆固醇的含量、油红O染色评估肝细胞脂质沉积程度;4.采用Western blot检测观察WRL68细胞中TRβ1及SUMO蛋白的表达情况。结果:1.NAFLD患者肝组织中TRβ1与SUMO1及SUMO3的蛋白表达较正常人明显升高。2.肝细胞脂质沉积结果显示:用不同浓度FFA(0.0mM、0.25mM、0.5mM)分别处理WRL68细胞6H、24H及48H,诱导肝细胞脂肪变。成功建立脂肪肝细胞模型,结合油红染色结果及细胞内TG、TC值,FFA诱导浓度以0.5mM为最佳,且诱导后24H为观察表型现象最佳时间。3.Western blot检测WRL68细胞结果显示:FFA诱导组TRβ1及SUMO1及SUMO3较Control组表达量明显升高,且随着诱导时间的增加表达量增加。结论:1.NAFLD肝组织中的TRβ1及SUMO1及SUMO3表达增加。2.肝细胞脂变过程中TRβ1及SUMO1及SUMO3表达增加,SUMO化修饰TRβ1参与了肝细胞脂变。
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