芦根多糖的提取技术和免疫调节作用研究

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多糖是在生物体中分布极广、自然界含量最丰富的生物聚合物之一。多糖或其衍生物具有多方面药理活性,具有提高机体免疫力、抗菌、抗病毒、抗寄生虫、抗肿瘤、抗辐射、抗衰老、抗氧化、抗炎、降血糖、降血脂等一系列作用;其中多糖的免疫调节作用尤为重要,因此又叫免疫活性多糖。芦根,来源广泛且无毒副作用,是历版中国药典和众多医药古籍图书都有收载的常用中药品种,但国内外对芦根多糖至今尚无系统的免疫调节作用的研究和应用,本论文进行了芦根多糖的提取分离,优化了提取技术方案,并通过小鼠实验研究探讨了芦根多糖的免疫调节作用效果。主要研究结果和结论如下:1.通过正交试验优化了芦根多糖的四种提取技术方案条件:(1)热水浸提法:温度90℃、3次提取;时间依次分别为120min、80min、60min;料液比依次分别为1:5、1:3.5、1:2.5;提取率达到1.41%。(2)纤维素酶辅助热水浸提法:50℃;pH6;纤维素酶用量10U/mL(仅在第一次加酶)、3次提取、料液比依次分别为1:5、1:3.5、1:2.5;时间依次分别为90min、60min、45min,提取率达到1.63%。(3)超声波辅助热水浸提法:90℃;超声波功率150W;开3min停7min;3次提取;料液比依次分别为1:5、1:3.5、1:2.5的比例;时间依次分别为60min、40min、30min,提取率达到1.69%。(4)纤维素酶和超声波联合辅助热水浸提法:50℃;pH6;纤维素酶用量7.5U/mL(仅在第一次加酶);超声波功率150W、开3min停7min、3次提取;料液比依次分别为1:5、1:3.5、1:2.5;时间依次分别为60min、40min、30min;提取率达到1.75%。2.设低、中、高(8.4,16.7,33.4mg/Kg·d)三个剂量以灌胃方式给正常小鼠用药30天,与空白组相比较,高剂量组脾脏指数和胸腺指数分别提高33.24%和6.88%;单核-巨噬细胞吞噬指数提高5.34%;耳肿胀度提高13.92%;溶血素提高10.94%;NK细胞活性提高8.04%;与阳性药物(香菇多糖)推荐人用剂量的等效剂量(15mg/kg·d)相当,表明了芦根粗多糖对小鼠的器官免疫活性、细胞免疫活性、体液免疫活性、单核-巨噬细胞功能和NK细胞活性等免疫功能都具有一定程度的促进作用。
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