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目的: 检测鼻咽癌细胞系CNE2肿瘤干细胞中mTOR的表达情况，探索雷帕霉素通过调控鼻咽癌肿瘤干细胞mTOR信号通路来抑制其增殖的作用。 方法: 1.通过无血清悬浮培养法来富集鼻咽癌细胞系CNE2肿瘤球细胞，用CCK8法检测成球细胞及CNE2细胞在含血清培养基中不同时间（第1、3、5、7天）的增殖活性。 2.利用Western blot法检测鼻咽癌肿瘤球细胞及CNE2细胞中干细胞标记物蛋白CD44、OCT4、SOX2和mTOR及其下游相关蛋白P70S6、4EBP1的表达。 3.CCK8法检测不同浓度雷帕霉素(0、0.1、1、10、100、1000nmol/L)作用鼻咽癌肿瘤球细胞及CNE2细胞48小时后的细胞抑制率，计算各自半数有效浓度(EC50)。 4.不同浓度的雷帕霉素(0、20、50、100 nmol/L)作用鼻咽癌肿瘤球细胞48小时后，利用Western blot检测mTOR及其信号通路下游相关蛋白P70S6、4EBP1的表达。 5.统计学处理方法:采用SPSS19统计软件处理分析数据，实验数据以均数±标准差((x)±s)表示，两组样本均数之间比较采用独立样本t检验方法，多组样本间均数的比较采用单因素方差分析方法，多组样本间进一步多重比较采用LSD-t检验方法，P＜0.05表示差异具有统计学意义。 结果: 1.成球细胞在含血清培养基中增殖较CNE2细胞明显，与CNE2相比，成球细胞OCT4、SOX2呈过度表达(OCT4:t=2.577 P=0.042＜0.05; SOX2: t=8.490P=0.000＜0.05)，而在CD44的表达上，两组间的差异无统计学意义(t=1.456 P=0.196＞0.05)。 2.在mTOR、P70S6、4EBP1的表达上，两组细胞间无明显差异(mTOR:t=0.333P=0.751＞0.05;4EBP1: t=0.218 P=0.835＞0.05; P70S6: t=0.812P=0.448＞0.05)，而在各自磷酸化形式(P-mTOR、P-P70S6、P-4EBP1)的表达上，成球细胞较CNE2明显呈过表达状况(P-mTOR: t=4.022 P=0.007＜0.05;P-4EBP1: t=8.243 P=0.000＜0.05; P-P70S6:t=7.969 P=0.000＜0.05)。 3.不同浓度雷帕霉素作用鼻咽癌成球细胞及CNE2细胞48小时后，对比两者半数有效浓度(EC50)，成球细胞为27.59nM，CNE2细胞为78.12nM，雷帕霉素对成球细胞具有更强抑制作用。 4.不同浓度雷帕霉素作用成球细胞48小时后，在P-mTOR、P-P70S6、P-4EBP1的表达上随浓度的升高而呈逐渐下降趋势，而在mTOR、P70S6、4EBP1表达上的差异无统计学意义。 结论: 1.通过无血清悬浮培养法富集起来的鼻咽癌细胞系CNE2肿瘤球细胞，具有类肿瘤干细胞特性。 2.鼻咽癌肿瘤干细胞中mTOR信号通路相关蛋白呈过度表达。 3.相对鼻咽癌细胞系CNE2，雷帕霉素对鼻咽癌肿瘤干细胞具有更强的抑制作用，并表现出一定的剂量依赖性 4.雷帕霉素可通过下调mTOR信号通路相关蛋白的表达来抑制鼻咽癌肿瘤干细胞增殖活性。 5.据此推断:鼻咽癌细胞系CNE2肿瘤干细胞中mTOR信号通路蛋白呈过度表达状态，而雷帕霉素可通过调控mTOR信号通路来抑制其增殖活性，针对肿瘤干细胞mTOR信号通路靶向治疗，雷帕霉素有望为治疗鼻咽癌提供新的途径。